[发明专利]一种白酒酒醅纤维素降解菌的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种白酒酒醅纤维素降解菌的制备方法及应用，制备方法包括以下步骤：S1.将酒醅样品置于CMC‑Na液体培养基中进行传代培养，收集培养物；S2.将培养物稀释后分别于CMC‑Na液体培养基中进行培养，再分别接种于多份刚果红固体培养基以筛选出纤维素降解能力最强的菌群；S3.将S2所得菌群经反复降温处理，然后再次分别接种于多份刚果红固体培养基，选出纤维素降解能力最强的菌群，即得。本发明得到的白酒酒醅纤维素降解菌，为纤维素资源的有效利用提供菌种资源。

技术领域

本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一种白酒酒醅纤维素降解菌的制备方法及应用。

背景技术

纤维素是植物光合作用的产物，细胞壁的重要成分，也是地球上最丰富的可再生性能源之一。纤维素分子是以吡喃葡萄糖苷为单元，由β-1，4-糖苷键连接形成的直链多糖，通过氢键缔合形成纤维束。由于分子结构稳定，自然状态难被降解，导致目前大量纤维素资源未得到充分利用。利用纤维素酶将纤维素降解成可发酵性糖是利用纤维素资源的有效途径。纤维素酶是能将纤维素水解成葡萄糖和纤维二糖的一组酶系的总称，由于其主要由纤维素降解菌在诱导物的作用下产生，选育高效的纤维素降解菌成为了有效利用纤维素资源的关键。虽然已有研究选育的许多菌株显示出良好的应用效果，但总体上，我国纤维素酶工业仍处于初级开发阶段，受酶催化率低、生产成本高和周期长等问题的影响，纤维素酶的制备远无法满足工业发展的需要。因此，进一步发掘高活力的纤维素降解菌尤为必要。

白酒酿造环境具有丰富的微生物资源，是选育高效发酵菌株的天然宝库。近年研究表明，纤维素降解菌是参与白酒酿造的优势菌群。酒醅是酿酒原料经微生物发酵的产物，也是白酒发酵物质能量代谢活动最活跃的反应中心。理论上，以酒醅为研究材料更有利于分离高活力的功能菌株。但由于白酒发酵温度多在28℃～35℃，因此白酒酒醅中的菌群多适宜该温度的生长，但由于对于秸秆等的腐熟降解多在自然温度下进行，在大多数情况下低于白酒酒醅菌群的生长适宜温度，因此会对白酒酒醅纤维素降解菌的应用环境造成限制。

发明内容

本发明的目的在于：为了拓展纤维素降解菌资源，扩大白酒酒醅纤维素降解菌的应用环境，提供一种白酒酒醅纤维素降解菌的制备方法及应用。

本发明采用的技术方案如下：

一种白酒酒醅纤维素降解菌的制备方法，包括以下步骤：

S1.将酒醅样品置于CMC-Na液体培养基中进行传代培养，收集培养物；

S2.将培养物稀释后分别于CMC-Na液体培养基中进行培养，再分别接种于多份刚果红固体培养基以筛选出纤维素降解能力最强的菌群；

S3.将S2所得菌群经反复降温处理，先在20℃～25℃保温20～28h，再在5℃～15℃保温15～18h，然后在20℃～25℃保温20～28h，最后在28℃～35℃保温20～28h；重复3～6个循环；然后再次分别接种于多份刚果红固体培养基，选出纤维素降解能力最强的菌群，即得。

本发明通过从白酒酒醅中筛选制备出纤维素降解能力强的菌群，并对菌群进行反复降温处理，分段降温和循环降温，在尽量保证菌株活性的情况下，驯化菌群的耐寒能力，以使得筛选得到纤维素降解菌能够直接用于水稻田中进行秸秆降解，而水的温度相对环境温度较低，本发明得到的纤维素降解菌能够适应水稻田中较低的水温，在实际生产中使用方便，无需将秸秆收集移出水稻田，极大的扩大了应用。

菌群经反复降温处理，先在20℃～25℃保温20～28h，驯化菌群初步适应较低温度，再在5℃～15℃保温15～18h，进一步驯化菌群对低温的耐受性，然后在20℃～25℃保温20～28h，稍微提高温度，一方面缓和极低温度对菌群的刺激，另一方面提高菌群对所需耐受温度的的耐受性，最后在28℃～35℃保温20～28h，恢复至常温，提高菌群活性；重复3～6个循环，本发明的方法通过多梯度分段降温以及多次循环驯化菌群，以制得能够直接用于水稻田中进行秸秆降解的菌群。