[发明专利]一种提取核酸的方法

权利要求书

1.一种核酸提取的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)将含有核酸的混合物与第一溶液混合，水浴至完全溶解，得到第一核酸溶液；

2)向步骤1)中得到的所述第一核酸溶液中加入第二溶液混合均匀后，进行第一次离心获得第一沉淀；

3)向步骤2)中得到的所述第一沉淀中加入第三溶液洗涤，进行第二次离心获得第二沉淀，随后采用质量分数70％的乙醇水溶液洗涤，进行第三次离心，获得核酸并保存；

其中所述第一溶液为二价金属化合物与硫酸氰胍形成的水溶液；所述第二溶液为一价金属化合物与三羟甲基氨基甲烷形成的水溶液；所述第三溶液为一价金属化合物和柠檬酸形成的水溶液。

2.根据权利要求1所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第一溶液中，所述二价金属化合物的质量浓度为10-30g/L,所述硫酸氰胍的质量浓度为200-600g/L。

3.根据权利要求2所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第一溶液中,所述二价金属化合物为氯化镁、硫酸镁、醋酸镁、氯化钙、氯化锰中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第二溶液中，所述一价金属化合物的质量浓度为10-30g/L,所述三羟甲基氨基甲烷的质量浓度为10-30g/L。

5.根据权利要求4所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第二溶液中，所述一价金属化合物为碳酸钠、碳酸钾、磷酸二钠、磷酸二钾、磷酸三钠、磷酸三钾中的一种。

6.根据权利要求1所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第三溶液中，其中所述一价金属化合物的质量浓度为30-50g/L,所述柠檬酸的质量浓度为1-5g/L。

7.根据权利要求6所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在所述第三溶液中，所述一价金属化合物为醋酸钠、醋酸钾、柠檬酸钠、柠檬酸钾、乳酸钠、EDTA钠中的一种。

8.根据权利要求2所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：所述含有核酸的混合物与第一溶液混合的用量体积比为1:1-3，水浴温度为50℃。

9.根据权利要求4所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在步骤2)中，所述第一核酸溶液与第二溶液的用量体积比为1:1-3，所述第一离心速度为≧12000rpm，离心时间为30s。

10.根据权利要求6所述的一种核酸提取的方法，其特征在于：在步骤3)中，所述第一沉淀与第三溶液的用量体积比为1:10-50，所述第二离心速度为≧12000rpm，离心时间为5min，所述第二沉淀与乙醇溶液的用量体积比为1:10-50，所述第三离心速度为≧12000rpm，离心时间为1-2min，所述保存的条件为采用无菌水或10mM Tris-Hcl 8.0缓冲液进行溶解，并在-20℃保存。