[发明专利]一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法

权利要求书

1.一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜标准溶液，分别注入高效液相色谱仪-紫外或二极管阵列紫外检测器进行分析，得到各个标准溶液的色谱图，再分别以标准溶液的浓度和测得相应浓度的色谱峰面积的值绘制关系曲线图，得到标准曲线的拟合方程；

2)称取糯米类食品的样品于烧杯中，加入蒸馏水，在温度为55℃-65℃的水浴条件下震荡，加入酶活活性为2000-7000U/g的中温淀粉酶酶解，中温淀粉酶与样品的质量比为50mg~150mg:5g，酶解时间不少于3h，得到酶解液；

3)在步骤2)的酶解液中加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，其中，亚铁氰化钾溶液的浓度为92g/L，亚铁氰化钾溶液与样品的体积质量比为2~3mL：5g，乙酸锌溶液的浓度为183g/L，乙酸锌溶液与样品的体积质量比为2~3mL:5g，混匀，定容，离心，离心转速为10000-15000r/min，离心时间为5-10min，得到上清液；将上清液经过滤膜过滤，得到滤液；

4)将步骤3)的滤液注入高效液相色谱仪-紫外或二极管阵列紫外检测器中进行检测，分别测得样品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜的色谱峰面积，得到的色谱峰面积的值通过步骤1)中对应的标准曲线的拟合方程计算得到各个待测组分的浓度c；

5)根据以下换算公式分别得到样品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜的含量：

式中：

X—待测组分在样品中的含量，单位为克每千克(g/kg)；

c—通过标准曲线的拟合方程计算得到的各个待测组分的浓度，单位为毫克每升(mg/L)；

V—样品溶液的定容体积，单位为毫升(mL)；

m—样品称样量，单位为克(g)；

1000—单位转换系数。

2.根据权利要求1所述的一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于，所述的中温淀粉酶为适用于55℃-65℃条件下的α-淀粉酶。

3.根据权利要求1所述的一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜标准溶液的具体配制方法如下：

分别准确移取25、50、100、250、500μL浓度为1000mg/L的苯甲酸储备液于5个10mL容量瓶中，用水定容至刻度，同样地，分别配置山梨酸、糖精钠、安赛蜜的不同浓度的标准溶液，得到四种待测组分的浓度梯度均为2.5、5、10、25、50mg/L的标准系列工作液，将不同浓度的标准溶液分别注入高效液相色谱仪-紫外或二极管阵列紫外检测器进行分析，测得相应浓度的色谱峰面积的值，其中色谱条件为：

a)色谱柱：Waters SunFire C18，5 μm，4.6mm×250mm；

b)流动相：A相：甲醇，B相：20mmol/L的乙酸铵水溶液，其中，A相和B相的体积比为5:95；

c)进样量：10μL；

d)流速： 1.0mL/min；

e)柱温：35-40℃；

f)检测器的波长：230nm；

以标准溶液的浓度为横坐标，相应的色谱峰面积的值为纵坐标绘制标准曲线，分别绘制苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜标准溶液的浓度与色谱峰面积的值的关系曲线图, 得到标准曲线的拟合方程。

4.根据权利要求1所述的一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于，所述步骤2)的具体步骤为：

称取5g糯米类食品的样品于烧杯中，加入10mL蒸馏水中，在温度为60℃的水浴条件下震荡，震荡速度为150r/min，加入酶活活性为2000U/g中温淀粉酶酶解，所述的中温淀粉酶与所述样品的质量比为100 mg:5g，酶解时间为4h，得到酶解液。

5.根据权利要求1所述的一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于，所述步骤3)的具体步骤为：

以5g糯米类食品的样品为例，在步骤2)的酶解液中加入3mL浓度为92g/L亚铁氰化钾溶液和183g/L乙酸锌溶液，混匀，定容至50mL，离心，离心转速为15000r/min，离心时间为10min，得到上清液；将所述上清液经过0.22μm的水相微孔滤膜过滤，得到滤液。

6.根据权利要求1所述的一种糯米类食品中防腐剂和甜味剂的检测方法，其特征在于，所述步骤4) 的高效液相色谱仪-紫外或二极管阵列紫外检测器的色谱条件为：

a)色谱柱：Waters SunFire C18，5μm，4.6mm×250mm；

b)流动相：A相：甲醇，B相：20mmol/L的乙酸铵水溶液，其中，A相和B相的体积比为5:95

c)进样量：10-20μL；

d)流速：0.8-1.0mL/min；

e)柱温： 35-40℃；

f)检测器的波长：230nm。