[发明专利]一种脱毒马铃薯试管培育的方法

权利要求书

1.一种脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1、马铃薯试管苗的诱导：对马铃薯进行催芽处理，当马铃薯苗芽生长到3-5cm时，对苗芽采用流水冲洗，然后再对苗芽用70～80％酒精消毒处理20S～40S以去除酯质，去除酯质后使用0.2％氯化汞处理6～8分钟并用无菌水冲洗冲洗4～5遍，将冲洗后的苗芽切取0.2～0.4mm的马铃薯茎尖，将其接种到MS培养基，并对其光照处理后诱导出马铃薯试管苗；

步骤S2、马铃薯试管苗的培育：将诱导出的马铃薯试管苗在生长到5-6cm时移栽到添加了6-BA和IAA的MS培养基培育，其中6-BA的浓度为0.01～0.2mg/L，IAA的浓度为0.01～0.15mg/L；

步骤S3、马铃薯试管苗的病毒鉴定：采用多重RT-PCR检测技术对诱导出的马铃薯试管苗进行检测，并筛选出脱毒马铃薯试管苗；

步骤S4、脱毒马铃薯试管苗壮苗培育：将不含琼脂的MS无菌液体培养基加入到无菌培养瓶中，并在无菌培养瓶中接种3-5cm长的脱毒马铃薯试管苗茎段，得到脱毒马铃薯试管苗壮苗；

步骤S5、试管薯的诱导：将脱毒马铃薯试管苗壮苗切成含有一芽一叶的茎段，然后将其接种到添加了蔗糖、活性炭和香豆素的MS培养基上并在适当光照下进行培育，其中蔗糖的浓度为70～90g/L，活性炭的浓度为0.8～1.2g/L，香豆素的浓度为10～30mg/L，光照时间4～12h/d，光照强度2000～2500Lx；

步骤S6、待60～70天后收获脱毒试管薯。

2.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S1中，光照处理的光照强度为2000lx，光照时间12h/d。

3.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S1中，MS培养基的PH值设置为5.5～6.0，其所处环境温度为25±1℃。

4.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S1中，在超静工作台上对苗芽去除酯质。

5.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S1中，采用解剖刀切取马铃薯茎尖。

6.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S3中，进行病毒测试的马铃薯试管苗为5-6cm。

7.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管培育的方法，其特征在于，在步骤S5中，MS培养基的PH值设置为5.5～6.0，其所处环境温度为25±3℃。