[发明专利]一种脱毒马铃薯试管培育的方法

说明书

本发明公开一种脱毒马铃薯试管培育的方法，包括如下步骤：步骤S1、马铃薯试管苗的诱导；步骤S2、马铃薯试管苗的培育；步骤S3、马铃薯试管苗的病毒鉴定；步骤S4、脱毒马铃薯试管苗壮苗培育；步骤S5、试管薯的诱导；步骤S6、待60～70天后收获脱毒试管薯。本发明通过设置液体培养基促进马铃薯试管苗的生长，有效节约生产成本，再通过光照以诱导马铃薯试管苗形成马铃薯试管薯，一方面提高了马铃薯试管苗的成薯指数、薯块重量、大薯率、最大薯重和薯块直径，另一方面有效改善马铃薯产量品质低的问题，有利于实现马铃薯的自动化大规模生产。

【技术领域】

本发明涉及马铃薯培育领域，特别地，涉及一种脱毒马铃薯试管培育的方法。

【背景技术】

马铃薯是世界上仅次于水稻、玉米小麦的第四大粮食作物，广泛分布于世界各地。在生产过程中，由于病毒的侵染，马铃薯容易出现生长势衰退、薯块变小或畸形等一系列的退化现象，导致其产量及质量的下降，严重影响马铃薯的生产，可靠的繁种技术是确保马铃薯高产优质的基础，传统的繁种技术容易使病毒在种薯中世代积累和传递，导致马铃薯种性退化，造成马铃薯减产，减产幅度在20％～50％之间。

脱毒试管薯技术能有效解除病毒侵染的制约，以该技术为核心构建种薯工厂化生产的现代繁种工业体系，能实现周年稳定的规模产出，为种植业提供优质脱毒种薯，通过采用马铃薯茎尖脱毒，脱毒苗快繁生产小种薯是解决马铃薯病毒侵染和品种退化以提高产量和品质的最好途径。

试管薯是马铃薯试管苗在培养瓶内合适条件下从腋芽中诱导出产生的2-10mm小种薯，具有重量轻，体积小，易储存，繁殖速度高于常规田间生产，不受季节限制，栽培成活高突出优点，此外，试管薯也是研究马铃薯碳水化合物代谢的一个适宜模式，同时它还是进行遗传转化的良好受体。试管薯的诱导是受“基因型－环境－生物化学因子”相互作用、共同调节的复杂过程。基因型的差异是影响试管薯诱导的主要因素之一。在相同的诱导条件下，早熟品种的试管苗结薯能力强于晚熟品种。温度对试管薯的诱导有一定的影响，昼夜变温环境条件下，试管薯诱导率较高其中，光照也是影响马铃薯试管薯形成的主要原因，但是，目前相关文献中仅记载了试管薯的诱导及生长需要在黑暗条件下完成，如何通过光照和其他因素来提高脱毒马铃薯试管苗在瓶内诱导生长成试管薯的结薯率并未见相关文献研究。

鉴于此，有必要提供一种改进的脱毒马铃薯试管培育的方法。

【发明内容】

本发明的目的在于提供一种脱毒马铃薯试管培育的方法，以解决上述背景技术中出提出的问题。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：一种脱毒马铃薯试管培育方法，包括如下步骤：

步骤S1、马铃薯试管苗的诱导：对马铃薯进行催芽处理，当马铃薯苗芽生长到3-5cm时，对苗芽采用流水冲洗，然后再对苗芽用70～80％酒精消毒处理20S～40S以去除酯质，去除酯质后使用0.2％氯化汞处理6～8分钟并用无菌水冲洗冲洗4～5遍，将冲洗后的苗芽切取0.2～0.4mm的马铃薯茎尖，将其接种到MS培养基，并对其光照处理后诱导出马铃薯试管苗；

步骤S2、马铃薯试管苗的培育：将诱导出的马铃薯试管苗在生长到5-6cm时移栽到添加了6-BA和IAA的MS培养基培育，其中6-BA的浓度为0.01～0.2mg/L，IAA的浓度为0.01～0.15mg/L；

步骤S3、马铃薯试管苗的病毒鉴定：采用多重RT-PCR检测技术对诱导出的马铃薯试管苗进行检测，并筛选出脱毒马铃薯试管苗；

步骤S4、脱毒马铃薯试管苗壮苗培育：将不含琼脂的MS无菌液体培养基加入到无菌培养瓶中，并在无菌培养瓶中接种3-5cm长的脱毒马铃薯试管苗茎段，得到脱毒马铃薯试管苗壮苗；