[发明专利]一种荧光微球标记抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种荧光微球标记抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将100-1000mg/mL的化学交联剂溶液加入1-50mg/mL的荧光微球溶液中进行活化；

2)将标记抗体和质控蛋白进行混合，得到总蛋白，将该总蛋白加入步骤1)得到的活化产物中进行反应；

3)将封闭剂加入步骤2)得到的溶液中进行封闭，离心，得到所述荧光微球标记抗体。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述荧光微球溶液与化学交联剂溶液的重量比例为1:0.1-5；所述荧光微球的粒度为100nm-500nm；所述活化的时间为5-30min。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述化学交联剂选自1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、戊二醛和过碘酸盐、氯胺-T中的至少一种。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述总蛋白和荧光微球的重量比例为1：(200-1)；所述标记抗体和质控蛋白的重量比例为1:(0.1-20)；所述反应的转速为50-150rpm，时间为2-5h。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述标记抗体选自人肌红蛋白标记抗体、人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白标记抗体、肌钙蛋白I标记抗体、N端-B型脑尿肽前体标记抗体、降钙素原记抗体、C反应蛋白标记抗体、D-二聚体标记抗体、人绒毛膜促性腺激素β亚基标记抗体、脂蛋白相关磷脂酶A2标记抗体、抗缪勒氏管激素标记抗体、白介素6标记抗体、血清淀粉样蛋白A标记抗体或胱抑素C标记抗体；所述质控蛋白选自牛血清白蛋白BSA、鸡IgY抗体、兔源抗体、羊源抗体或驴源抗体。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述封闭剂选自1-5wt％牛血清白蛋白溶液、0.1-5wt％酪蛋白溶液和10-50mM甘氨酸中的至少一种。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述封闭剂与溶液的体积比例为1:(0.01-2)。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述封闭的时间为5min-1h；所述离心的转速为10000-20000rpm，时间为8-20min。

9.一种荧光微球标记抗体，其特征在于，所述荧光微球标记抗体是通过权利要求1-8任一项所述的方法制备的。

10.一种权利要求9所述的荧光微球标记抗体在侧向免疫层析中的应用。