[发明专利]一种外泌体在制备修复皮肤损伤的药品或化妆品中的应用

权利要求书

1.一种外泌体在制备修复皮肤损伤的药品或化妆品中的应用，其特征在于，所述外泌体提取自鹿茸间充质干细胞，所述皮肤损伤为擦伤、烧伤、皮肤创面感染和慢性难愈合创面损伤；鹿茸间充质干细胞来源的外泌体能够抑制皮肤炎症。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述鹿茸间充质干细胞来源的外泌体通过如下方法制备获得：

1）鹿茸间充质干细胞的原代分离：将鹿茸组织经预处理后，取其间充质区，分离获得间充质干细胞；

2）鹿茸间充质干细胞外泌体的提取：将步骤1）中获得的间充质干细胞经培养后，收集细胞培养液，经分离提取得到外泌体。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤1）所述预处理是指剥去鹿茸真皮层，将鹿茸组织经含有双抗的PBS清洗后，再用高糖培养基清洗，然后离心弃上清，得到间充质区；所述双抗是指终浓度为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素，所述PBS是指磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤1）所述间充质干细胞通过如下方法获得：将预处理后的间充质区切块，置于含有双抗的低糖培养基中混匀，加入PBS混匀后离心，弃上清，获取间充质干细胞团，然后经胶原酶I消化，得到间充质干细胞；所述双抗是指终浓度为100U/mL的青霉素和终浓度为100µg/mL链霉素。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）所述培养是指将间充质干细胞置于10%无外泌体胎牛血清DMEM/F12培养基中，37℃和5% CO₂条件培养36 h。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）所述分离提取是指将收集的细胞培养液离心，收取上清液后进行离心处理，获得的上清液过滤后再次离心，弃上清，向沉淀中加入PBS混匀得到悬液，将悬液离心后弃上清，加入PSB溶液后静置，然后过滤，获得鹿茸间充质干细胞来源的外泌体。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述胶原酶I用量为细胞体积的4-5倍，所述胶原酶的浓度为0.075g/mL。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤2）所述收取上清液后进行离心处理中，离心处理是指将细胞上清液经1,500×g离心15min，收取上清；再经10，000×g离心30min；所述悬液离心条件为120,000×g离心60min。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述过滤均为经过0.22µm滤器进行过滤；所述静置时间为15min。