[发明专利]一种TERT突变检测试剂盒及在肿瘤无创诊断中的应用

权利要求书

1.一种引物组合，其特征在于，所述引物组合的序列如下：

forward：5’-CCTGCCCCTTCACCTTCCAG-3’；

reverse：5'-AGCGCTGCCTGAAACTCG-3’。

2.权利要求1所述引物组合在检测TERT突变产品中的应用。

3.如权利要求2所述引物组合在检测TERT突变产品中的应用，其特征在于，所述检测TERT突变产品为通过所述引物组合特异性结合后进行核酸扩增的检测产品，优选的，为一种基于PCR进行检测的产品。

4.如权利要求3所述引物组合在检测TERT突变产品中的应用，其特征在于，所述基于PCR进行检测的产品包括荧光定量PCR、逆转录PCR、RACE-PCR、巢式PCR、反向PCR、降落PCR或数字PCR；优选的，所述数字PCR为ddPCR。

5.如权利要求2所述引物组合在检测TERT突变产品中的应用，其特征在于，所述检测TERT突变的产品为一种检测试剂盒；

或所述TERT突变为C228T和C250T两个突变位点；

或所述检测TERT突变的产品用于膀胱、肾盂癌、恶性黑色素瘤、脑胶质细胞瘤及肝肿瘤样本的检测；

或所述检测TERT突变的产品，其检测样本为肿瘤组织、尿液或血液。

6.一种TERT突变检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中包括引物、探针及扩增试剂；

所述引物序列如下：

forward：5’-CCTGCCCCTTCACCTTCCAG-3’；

reverse：5'-AGCGCTGCCTGAAACTCG-3’；

所述探针序列如下：

TERT突变型探针序列：5’-/56-FAM/CCC+C+T+T+CCGG/3IABk FQ/-3’；

TERT野生型探针序列：5’-/5HEX/CCCC+C+T+CCGG/3IABkFQ/-3’。

7.如权利要求6所述TERT突变检测试剂盒，其特征在于，所述扩增试剂包括但不限于限制性内切酶、缓冲盐、ddPCR预混液，通过水补充余量；优选的，所述扩增试剂中还包括生物碱。

8.如权利要求7所述TERT突变检测试剂盒，其特征在于，所述限制性内切酶为CviQIenzyme、所述缓冲盐为Na₂EDTA。

9.一种膀胱癌或肾盂癌的无创诊断方法，其特征在于，所述诊断方法包括采用权利要求1所述引物组合、或权利要求6-8任一项所述试剂盒对待诊断个体的病理样本进检测；

优选的，所述诊断方法包括检测待诊断对象病理样本中TERT突变类型及含量，依据统计学分析结果分析对待诊断对象的患病情况作出判断。

10.一种膀胱癌或肾盂癌预后的判断方法，其特征在于，所述判断方法包括采用权利要求1所述引物组合、或权利要求6-8任一项所述试剂盒对待诊断个体的病理样本进检测；

优选的，所述预后判断方法如下：检测患者病理样本中的TERT突变类型及含量，依据统计学分析结果分析对患者的预后情况作出判断。