[发明专利]一种鱼安定半抗原、抗原和抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种鱼安定半抗原，其特征在于，具有如下所示的结构

2.权利要求1所述的鱼安定半抗原的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：将鱼安定与对醛基苯甲酸在甲醇中发生缩合反应后，再经硼氢化钠还原得到具有如式I所示的分子结构的鱼安定半抗原。

3.根据权利要求2所述鱼安定半抗原的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

S11.将鱼安定溶于适量的甲醇中；

S12.待S11溶解后加入三乙胺；

S13.将与S11等摩尔比的苯醛酸在适量甲醇中溶解后，搅拌条件下缓慢滴加到S1中；

S14.在预定温度下冷凝回流反应；

S15.加入硼氢化钠还原，在预定温度下冷凝回流；

S16.旋转蒸发干后得到黄色油状物质，水溶后用乙酸乙酯萃取，再将乙酸乙酯萃取液旋干，得到淡黄色粉末；

S17.将上述淡黄色粉末过硅胶柱，洗脱，然后蒸干所得即为如式I所示的鱼安定半抗原。

4.一种鱼安定人工抗原，其特征在于，具有如下式II所示分子结构：

其中，载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清白蛋白。

5.权利要求4所述的鱼安定人工抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将如权利要求1所述的鱼安定半抗原溶于DMF中，将载体蛋白溶解后加入，搅拌均匀后，再搅拌加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，室温偶联过夜；偶联混合物于4℃下PBS透析，得到鱼安定人工抗原；其中所述鱼安定半抗原与载体蛋白的摩尔比为400-600：1。

6.根据权利要求5所述鱼安定人工抗原的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

S21.将载体蛋白溶解于PBS缓冲液中，得蛋白溶液；

S22.将如权利要求1的鱼安定半抗原溶解于N,N-二甲基甲酰胺，并加入到S21所得的蛋白溶液中，搅拌混合得蛋白-半抗原混合液；

S23.取EDC溶解于水中，再搅拌滴加到S22的蛋白-半抗原混合液中，室温避光偶联过夜；

S24.反应完成后，用PBS透析，得到鱼安定人工抗原。

7.一种抗体，其特征在于，其采用如权利要求4所述鱼安定人工抗原制备得到。

8.根据权利要求7所述的抗体，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或基因工程抗体。

9.权利要求4所述人工抗原或权利要求7所述抗体在非诊断或治疗目的的鱼安定免疫检测分析中的应用。

10.一种非诊断或治疗目的的检测鱼安定的免疫分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

S31.将如权利要求4所述的鱼安定人工抗原免疫动物制备鱼安定的多克隆抗体，其中载体蛋白为牛血清白蛋白；

S32.将如权利要求4所述的鱼安定人工抗原作为包被原包被在微孔板上，其中载体蛋白为鸡卵清白蛋白；将步骤S31制备得到鱼安定的多克隆抗体加入微孔板中；

S33.加入待测样品，采用竞争ELISA测定待测样品中鱼安定的含量。