[发明专利]一种高产多糖的灵芝菌丝体培养基及其培养方法

说明书

本发明公开了一种高产灵芝多糖的灵芝菌丝体培养基，该培养基可以提供灵芝菌丝体生长所需的营养物质，促进灵芝菌丝的生长，增加灵芝多糖的合成，还提高对灵芝对金属的耐受性。本发明简单有效，易于操作，可提高生产效率，缩短培养时间，有利于高产多糖的灵芝菌丝体的工业化生产。通过该方法生产的灵芝菌丝体生长周期短，菌丝浓密，产量较高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，一种高产多糖的灵芝菌丝体培养基及其培养方法。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)，属于担子菌纲、多孔菌科、灵芝属，具有多种有效成分，如：多糖类、多糖类、蛋白质类、氨基酸多肽类、核苷类、微量成分等，其中灵芝多糖是灵芝中重要的组成成分，具有广泛的生物活性，如增强免疫力、清除人体自由基、保护心血管、抗辐射、保护肝脏、抗肿瘤等作用。

传统栽培灵芝易受环境、人工种植方式等外在因素影响比较大，且生长周期长，难以实现大规模工业化生产。液体发酵灵芝菌丝体是在适当培养基及培养参数控制下，通入无菌空气于摇瓶或发酵罐，能保证菌丝体质量、数量及多糖含量的增加、且快速产生大量次级代谢产物的一种培养方式，具有产量高、周期短、成本低、适于工业化生产等优点。

灵芝多糖作为灵芝重要的生物活性成分，大量研究证明该类多糖能够激活免疫细胞、调节细胞因子分泌，参与宿主特异性免疫与非特异性免疫，从而提高机体免疫功能。灵芝多糖主要存在于灵芝细胞壁内壁，对灵芝多糖的进一步研究将有利于灵芝中有效成分的寻找和进一步探索新的活性并阐明其药理活性机制，如何通过调整发酵培养基及培养条件使灵芝多糖产量和灵芝菌丝生物量增加，是目前急需解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高产灵芝多糖的培养基，该培养基可以提供灵芝菌丝体生长所需的营养物质，灵芝菌丝生长好，还能提高灵芝菌丝多糖类物质，提高对灵芝对金属的耐受性。

本发明的上述发明目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种高产多糖的灵芝菌丝体培养基，所述培养基包括种子培养基和发酵培养基，所述种子培养基为，按质量百分数比由以下成分组成：1％-5％的葡萄糖，0.5～1.5％的蛋白胨，0.01～3.0％的酵母粉，0.01％-1.0％的磷酸二氢钾，0.01％-2.5％的七水合硫酸镁，0.15％-0.2％维生素B1，余量为水，使得组份含量百分数之和为100％；

所述发酵培养基，按质量百分数比由以下成分组成：2％-10％的低聚半乳糖，0.5～1.5％的茁霉多糖，1％-5％的促进剂，2.5％-5％的蛋白胨，3％-4％的酵母粉，0.01％-1.0％磷酸二氢钾，0.01％-2.5％的七水合硫酸镁，0.15％-0.2％的维生素B₁，余量为水，使得组份含量百分数之和为100％。

优选的，所述种子培养基,按质量百分数比由以下成分组成：4％的葡萄糖，1％的蛋白胨，1.0％的酵母粉，0.5％的磷酸二氢钾，1.5％的七水合硫酸镁，0.16％维生素B1，余量为水，使得组份含量百分数之和为100％；

所述发酵培养基，按质量百分数比由以下成分组成:6％的低聚半乳糖，0.9％的茁霉多糖，3％的N-十四烷基-N甲基-2吡咯烷酮溴化盐，3.5％的蛋白胨，3.6％的酵母粉，0.6％的磷酸二氢钾，1％的七水合硫酸镁，0.18％的维生素B1，0.05％-0.1％的岩芹酸，余量为水，使得组份含量百分数之和为100％。

实验发现，以低聚半乳糖和茁霉多糖为碳源、以蛋白胨为氮源能够提高灵芝菌丝体中灵芝多糖的产量；并且，向发酵培养基中添加岩芹酸，能够进一步促进灵芝多糖的产量。同时，茁霉多糖还起到促进灵芝胞外多聚物的积累，提高对金属离子的耐受性，能够显著增加显著灵芝多糖的转化率；此外，N-十四烷基-N甲基-2吡咯烷酮溴化盐在培养基中可以降低培养基的黏度，促进氧的传递，防止培养基高黏度导致的菌体生长停止和灵芝多糖的转化受到抑制。