[发明专利]一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法

说明书

本发明提供一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法，前处理操作简单、快捷、样本用量少、分析时间短，5min之内可完成血浆中5种常见抗肿瘤药物的分离和检测；采用同位素内标法定量可以极大的消除基质干扰，而且不受预处理过程、上样体积和流动相等条件的影响，能够达到准确定量；可同时满足临床上高通量样本检测需求，为临床上联合应用提供药动学参考。

技术领域

本发明属于血浆检测技术领域，具体涉及一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法，具体抗肿瘤药物为：甲氨喋呤(Methotrexate，MTX)、7-羟基甲氨蝶呤(7-hydroxyMethotrexate，HMTX)、氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-FU)、紫杉醇(Paclitaxel，PCT)和多西他赛(Docetaxel，DCT)。

背景技术

治疗药物监测(TDM)是针对不同患者个体，量体裁衣式地制定给药方案的一种方法。通过定量测定血液中药物浓度来进行患者个体的剂量滴定，以便获得最佳的疗效、更好的耐受性，同时还可以降低毒副作用。因此，治疗药物的监测至关重要。

传统的微生物法费时且烦琐；而免疫分析法成本昂贵，专一性差，难以实现高通量检测，关键问题由于代谢产物的存在，抗体可能交叉反应使测定结果偏高。

甲氨蝶呤(MTX)是一种叶酸还原酶抑制剂，为叶酸类抗肿瘤药物，主要通过对二氢叶酸还原酶的抑制达到阻碍肿瘤细胞DNA的合成，从而抑制肿瘤细胞的生长和繁殖。临床上广泛用于治疗急性淋巴细胞性白血病、骨肉瘤、恶性淋巴瘤等。7-羟基甲氨蝶呤为MTX的主要代谢产物，研究表明，7-OHMTX体内浓度水平与大剂量MTX给药后的急性肝脏毒性相关，所以同时监测MTX和7-OHMTX具有重要的临床意义。

氟尿嘧啶(5-FU)是一种常用的抗代谢类抗肿瘤药物，该药需较长时间与肿瘤组织接触才能发挥抑制及杀灭肿瘤细胞的作用，确保有效的血药浓度是治疗的关键。而5-FU在杀灭肿瘤细胞的同时对机体正常细胞也具杀伤作用，若剂量使用不当，可致临床疗效不佳或发生骨髓抑制等严重毒性反应。因此，开展5-FU治疗药物浓度监测对临床合理用药有着重要的指导意义。

多西他赛(DCT)又名多烯紫杉醇，和紫杉醇(PCT)的作用相同，是一类从短叶紫杉树皮中提取的天然产物，通过与肿瘤细胞的微管蛋白结合，促进微管蛋白形成稳定的微管，从而抑制癌细胞的有丝分裂和增殖。临床上对乳腺癌、非小细胞肺癌、头颈癌及卵巢癌等多种实体瘤具有较好的抑制活性。

根据调研，以上抗肿瘤药物的检测方法主要有高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)和LC-MS/MS。HPLC-UV法专属性较差、灵敏度较低、样本用量大，且分析时间长，而LC-MS/MS法多采用液液萃取法处理血浆，操作繁琐和耗时。比如，中国专利(CN 105424843 A)公开了“一种测定多西他赛或紫杉醇的高效液相色谱-三重四级杆质谱联用方法”，该发明建立了ESI(-)和APCI(-)两种电离模式的质谱方法，采用液液萃取法处理样本，经过了萃取、氮吹和复溶的步骤，极大地增加了前处理时间。再比如，中国专利(CN 110320302 A)公开了一种“快速测定甲氨蝶呤血药浓度的方法”，该发明使用LC-MS/MS法虽前处理简单，但只测定了MTX的浓度，未监测主要代谢物7-OHMTX，而同时监测MTX和7-OHMTX才具有重要的临床意义。中国专利(CN 110927297 A)公开了“一种同时检测血液样品中多种抗肿瘤药物的方法”，该方法同时检测了13种抗肿瘤药物，但前处理复杂，需要蛋白沉淀后干燥处理再复溶后过滤，中国专利(CN 110045048 A)公开了“一种测定人血浆中两种抗肿瘤药物浓度的HPLC-MSMS方法”，检测种类有限，且前处理采用蛋白沉淀后氮吹复溶，前处理复杂，这些方法在临床应用比较受限。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法。

本发明的技术方案如下：

一种检测血浆中抗肿瘤药物浓度的方法，