[发明专利]可用于鉴别瘤牛和普通牛血统的基因组序列及其应用方法

权利要求书

1.序列如SEQ ID NO.1所示基因组序列在鉴别瘤牛和普通牛血统上的应用，瘤牛缺失所述基因组序列，普通牛正常；所述瘤牛指Nelore品种、Ndama品种和Muturu品种，所述普通牛指Holstein品种、Jersey品种、Angus品种和Hereford品种。

2.序列如SEQ ID NO.1所示基因组序列在牛品种纯繁、改良和保种上的应用，瘤牛缺失所述基因组序列，普通牛正常；所述瘤牛指Nelore品种、Ndama品种和Muturu品种，所述普通牛指Holstein品种、Jersey品种、Angus品种和Hereford品种。

3.序列如SEQ ID NO.2所示基因组序列在鉴别瘤牛和普通牛血统上的应用，瘤牛缺失所述基因组序列，普通牛正常；所述瘤牛指Nelore品种、Ndama品种和Muturu品种，所述普通牛指Holstein品种、Jersey品种、Angus品种和Hereford品种。

4.根据权利要求3所述基因组序列在鉴别瘤牛和普通牛血统上的应用，其特征在于：所述基因组序列用于鉴别瘤牛和普通牛血统时采用的PCR引物序列为：正向引物如SEQ IDNO.3所示，反向引物如SEQ ID NO.4所示。

5.一种鉴别瘤牛和普通牛血统的分子生物学方法，其特征在于：包括：

1）从待鉴定牛的组织中分离提取DNA；

2）以步骤1）DNA为模板，用一对引物：正向引物如SEQ ID NO.3所示，反向引物如SEQ IDNO.4所示，通过聚合酶链式反应PCR扩增；

3）取适量步骤2）扩增出的产物在1.5％琼脂糖凝胶中电泳；

4）观察步骤3）电泳结果，如果在1092bp处出现扩增条带即可判断所述待鉴定牛为普通牛，如果未出现相应的扩增条带即可判断所述待鉴定牛为瘤牛；

所述瘤牛指Nelore品种、Ndama品种和Muturu品种，所述普通牛指Holstein品种、Jersey品种、Angus品种和Hereford品种。

6.根据权利要求5所述鉴别瘤牛和普通牛血统的分子生物学方法，其特征在于：步骤2）中所述PCR扩增采用降落PCR，PCR条件为：94 ℃预变性4分钟；94 ℃变性30s，68 ℃退火30s，72 ℃延伸1min，以后每个循环依次降低1 ℃，共18个循环；94 ℃变性30s，50 ℃退火30s，72 ℃延伸1min，22个循环；72 ℃延伸10min。