[发明专利]一种表达荧光素酶的高产酒克雷伯菌及其用途

权利要求书

1.一种质粒，其特征在于，所述质粒包括一个组成型启动子和荧光素酶基因簇LUX A/B/C/D/E，该质粒的组成型启动子能够在高产酒克雷伯菌中启动LUX A/B/C/D/E基因的表达。

2.一种基因改造的高产酒雷伯菌，其特征在于，所述基因改造的高产酒克雷伯菌能稳定表达荧光素酶。

3.一种基因改造的高产酒克雷伯菌的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：

（1）制备包含LUX A/B/C/D/E基因簇的质粒，优选的，所述质粒还包含一个组成型启动子；

（2）制备电转化感受态高产酒克雷伯菌；

（3）将步骤（1）获得的质粒电转化步骤（2）中的感受态高产酒克雷伯菌，挑选阳性菌落，获得基因改造的高产酒克雷伯菌。

4.如权利要求3所述构建方法，其特征在于，所述质粒为含组成型启动子的泛宿主质粒，优选的，所述组成型启动子为PJ23119、CaMV 35S、P32启动子。

5.一种权利要求2所述基因改造的高产酒克雷伯菌的应用，其特征在于，所述应用包括在计算细菌浓度的评估方法中的应用、在筛选杀菌方法中的应用，在筛选药物中的应用，或者，在制备动物模型中的应用。

6.一种计算细菌浓度的评估方法，其特征在于，所述评估方法包括：（1）培养权利要求2所述基因改造的高产酒克雷伯菌，（2）通过稀释方法，调整菌株的浓度，通过检测荧光值计算基因改造的高产酒克雷伯菌的浓度，（3）绘制不同浓度基因改造的高产酒克雷伯菌的荧光值的标准曲线。

7.一种杀菌方法的评估方法，其特征在于，所述评估方法包括利用权利要求2所述基因改造的高产酒克雷伯菌对杀菌方法进行评估，优选的，所述杀菌方法包括利用紫外照射、酒精、NaOH或者84消毒液对携带高产酒克雷伯菌的物品进行杀菌，更优选的，所述杀菌方法包括紫外照射30min以上，或者以10%的84消毒液对物品进行消毒。

8.一种药物筛选方法，其特征在于，所述药物筛选方法包括利用权利要求2所述基因改造的高产酒克雷伯菌对药物进行筛选。

9.一种动物模型的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求2所述基因改造的高产酒克雷伯菌通过鼻饲、灌胃、腹腔注射、尾静脉注射等方法注入动物体内。

10.一种高产酒克雷伯菌的杀菌方法，其特征在于，所述杀菌方法包括利用紫外照射、酒精、NaOH或者84消毒液对携带高产酒克雷伯菌的物品进行杀菌，优选的，所述杀菌方法包括紫外照射30min以上，或者以10%的84消毒液对物品进行消毒 。