[发明专利]一种人参属中药中皂苷成分的分离方法

说明书

本发明实施例提供了一种人参属中药中皂苷成分的分离方法，包括：将待测品溶液依次经离子交换色谱‑亲水相互作用色谱‑反相色谱进行分离。采用本申请的分离方法，可以实现将人参属中药中的皂苷成分进行更系统地分离；进一步地，通过质谱检测，可以获得更全面的皂苷成分鉴定结果、发现更多微量皂苷。

技术领域

本发明涉及中药成分分离技术领域，特别是涉及一种人参属中药中皂苷成分的分离方法。

背景技术

五加科人参属植物多数对机体具有补益作用，其中以人参(Panax ginseng)、西洋参(P.quinquefolius)和三七(P.notoginseng)最为著名。这三种植物的根、茎叶、花均可作药用或保健品的原料，应用广泛。系统植化研究表明，人参、西洋参、三七的地上和地下部分，包括根、茎叶和花，均含有丰富的人参皂苷，为主要活性成分。例如，人参花具有提高免疫力、抗衰老、降低血糖与血压等功效；西洋参花具有提高免疫力和记忆力、抗溃疡、安神补脑等功效；三七花具有抗炎、抗氧化、抗癌、镇静安神、保护神经、提高免疫力等功效。

然而，由于现有分析技术的局限，难以对人参属中药中的皂苷进行全面、精细的分离，继而影响了后续对皂苷成分的全面、准确的检测与鉴定，因此亟需一种分析方法，以对皂苷成分进行更全面并且有效的分离。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种人参属中药中皂苷成分的分离方法，以实现人参属中药中皂苷成分的更系统、更精细的分离。具体技术方案如下：

本申请提供了一种人参属中药中皂苷成分的分离方法，包括：

以体积分数为60-80％的甲醇水溶液为溶剂，配制浓度为500-1000mg/mL的待测品溶液；

(1)将所述待测品溶液经离子交换色谱进行第一维分离，获得第一分段样品组；

其中，离子交换色谱分离条件包括：

固定相：强阴离子交换色谱柱；

流动相：A相为含有体积分数为0.05-0.15％冰醋酸的9.5-10.5mM醋酸铵水溶液，B相为甲醇；

采用15-25％A相，75-85％B相进行等度洗脱；柱温30-40℃；流速0.5-0.7mL/min；

(2)将所述第一分段样品组中的各样品，经亲水相互作用色谱进行第二维分离，获得第二分段样品组；

其中，亲水相互作用色谱分离条件包括：

固定相：酰胺基键合亚乙基杂化硅胶色谱柱；

流动相：A相为0.01-1％甲酸水溶液，B相为乙腈；采用10-50％A相，50-90％B相进行梯度洗脱；柱温30-40℃；流速0.5-1.5mL/min；

(3)将所述第二分段样品组中的各样品，经反相色谱进行第三维分离；

其中，反相色谱分离条件包括：

固定相：极性修饰十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相：A相为0.01-1％甲酸水溶液，B相为乙腈；采用5-85％A相，15-95％B相进行梯度洗脱；柱温30-40℃；流速0.2-0.4mL/min；

经反相色谱分离后的样品通过质谱检测，获得人参属中药中皂苷成分的质谱图。

本申请中，发明人出人预料地发现通过离子交换色谱-亲水相互作用色谱-反相色谱三种不同机制色谱构建的离线全三维色谱能够对皂苷成分全面、精细地进行分离。不限于理论，发明人认为第一维离子交换色谱实现酸性皂苷、中性皂苷的初步分离；第二维亲水相互作用色谱按照极性差异，实现酸性皂苷与中性皂苷进一步分离；第三维反相色谱按照分配机制实现皂苷成分的色谱分离。