[发明专利]一种水痘-带状疱疹病毒亚单位纳米疫苗的制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种水痘‑带状疱疹病毒亚单位纳米疫苗的制备方法和应用。具体公开了一种纳米颗粒，包含水痘‑带状疱疹病毒(VZV)gE重组蛋白、免疫佐剂、阳离子脂质和辅助脂质。本发明制备得到的纳米颗粒尺寸均匀，形态规则、外形圆整、表面光滑、分散性好，无明显粘连、破损、坍塌等现象；纳米颗粒中VZV gE重组蛋白具有较高的包封率；所述纳米颗粒施用于动物后，能产生较强的体液免疫，使细胞免疫明显增强，具有较大的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域。更具体地，涉及一种水痘-带状疱疹病毒亚单位纳米疫苗及其制备方法和应用。

背景技术

水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科，是一种双链DNA病毒，人类疱疹病3型(human herpes virus 3，HHV-3)，人是唯一的自然宿主。VZV引起的原发感染表现为水痘(varicella)，并在宿主的感觉神经节内潜伏，再激活时可引起带状疱疹(Herpes zoster，HZ)多见于成年人和老年人。VZV病毒只有一个血清型，一般动物和鸡胚对VZV不敏感，在人或猴纤维母细胞中增殖，并缓慢产生细胞病变，形成多核巨细胞，受感染细胞核内，可见嗜酸性包涵体。

带状疱疹是潜伏在体内的VZV复发感染。由于儿童时期患过水痘愈合，病毒潜伏在脊髓后根神经节或脑感染神经节中，当机体受到某些刺激，如发热、受冷、机械压迫，使用免疫抑制剂、X光照射，白血病及肿瘤等细胞免疫功能损害或低下时，导致潜伏病毒激活，病毒沿感觉神经轴索下行到达该神经所支配的皮肤细胞内增殖，进而在皮肤上沿着感觉神经的通路发生串联的水疱疹，形似带状，故名带状疱疹。带状疱疹发生时患者通常会出现发烧、乏力等症状，在局部皮肤开始发红并伴随有灼热感和神经疼痛感，1～4周内局部痛觉非常敏感，有剧痛。患水痘后机体产生特异性体液免疫和细胞免疫，终身不再感染。但对长期潜伏于神经节中病毒不能被清除，故不能阻止病毒激活而发生带状疱疹。

由于目前还没有针对水痘和带状疱疹的特效治疗性药物，临床大多使用阿昔洛韦等广谱的抗病毒药物进行治疗，也有使用一些麻醉性或非麻醉性的镇痛药以及抗惊厥、抗抑郁的药物来缓解带状疱疹带来的强烈神经痛，因此预防和控制VZV的感染工作显得十分重要，而接种疫苗是目前预防和控制VZV的最主要同时也是最有效的方式。目前上市的水痘与带状疱疹疫苗大均是基于Oka株VZV减毒活病毒开发获得的，其不同之处仅在于每次接种所使用的病毒剂量以及接种次数存在一定区别。除减毒活疫苗之外，VZV的亚单位疫苗和DNA疫苗目前也成为较受关注的研究内容。

传统的灭活或者减活疫苗的安全以及其引起的全身性免疫风暴在很多疫苗体系中无法避免。但随着现代分子生物学及生物化学的发展，亚单位蛋白疫苗及多肽疫苗的优势及应用得到广泛肯定。亚单位疫苗是通过化学分解或有控制性的蛋白质水解方法，提取细菌、病毒的特殊蛋白质结构，筛选出的具有免疫活性的片段制成的疫苗。相对全病毒疫苗来讲，亚单位疫苗安全性更高，稳定性更好；同时亚单位疫苗免疫具有持久性，一次接种可获得长期免疫力，无需反复多次加强免疫。