[发明专利]一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中头孢拉定浓度的方法

说明书

本发明公开了一种液相色谱‑串联质谱法测定血浆中头孢拉定浓度的方法，包括如下步骤：（1）对血浆样品进行前处理；（2）采用液相色谱‑串联质谱法测定步骤（1）中经前处理后的血浆样品中头孢拉定的浓度；所述液相色谱‑串联质谱法包括色谱条件和质谱条件，其中：所述色谱条件包括：以含0.1%甲酸和5mM醋酸铵的水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，流动相A与流动相B的体积比为70:30；等度洗脱，洗脱时间3.0min。采用本发明的方法可以实现对血浆中头孢拉定的快速、灵敏检测；而且血浆用量少，样品前处理简单。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中头孢拉定浓度的方法。

背景技术

头孢拉定（cefradine）是第1代半合成头孢菌素，是唯一可供口服、肌内及静脉注射用的头孢菌素，具有广谱抗菌作用，临床上主要用于呼吸道、泌尿道和皮肤软组织等轻、中度感染的治疗。

头孢拉定在组织体液中分布良好，它在心肌、子宫、肺、前列腺和骨组织中均可获有效浓度，其中脑组织中药物浓度仅为同期血药浓度的5-10%，脑脊液中浓度更低；血浆蛋白结合率为6-10%，口服0.5g后6h累积排出给药量的90%以上。目前已建立的血浆中头孢拉定的测定方法主要有HPLC法，但是，测定方法的流动相较为复杂，样品处理方法也较为繁琐；而且，由于头孢拉定在一些组织内的血药浓度较低，现有的测定方法的检测灵敏度仍有待提高。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中头孢拉定浓度的方法。采用本发明的方法可以实现对血浆中头孢拉定的快速、灵敏检测；而且血浆用量少，样品前处理简单。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中头孢拉定浓度的方法，包括如下步骤：

（1）对血浆样品进行前处理；

（2）采用液相色谱-串联质谱法测定步骤（1）中经前处理后的血浆样品中头孢拉定的浓度；

所述液相色谱-串联质谱法包括色谱条件和质谱条件，其中：

所述色谱条件包括：以含0.1%（体积百分比）甲酸和5mM醋酸铵的水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，流动相A与流动相B的体积比为70:30；等度洗脱，洗脱时间3.0min。

所述质谱条件包括：离子源：电喷雾电离正离子检测；喷雾气温度：550ºC；雾化气：55 psi；加热辅助气：55 psi；气帘气：40 psi；碰撞气：8 psi；喷雾电压（IS）：5500 V；扫描时间：160 ms；扫描方式：多反应监测（MRM）。

优选的，步骤（1）中，对血浆样品进行前处理的方法为：向100 µL血浆样品中加入50 µL内标溶液，再加入300 µL乙腈，涡流振荡5min，4℃条件下以4500 rpm速度离心10min，取上清液50 µL加入100 µL去离子水，混匀后，取2.0 µL进行LC-MS/MS分析。

更优选的，所述内标溶液为250 ng/mL的泰比培南溶液。

优选的，步骤（2）中，所述色谱条件还包括：分析柱为Eclipse Plus C18色谱柱；流速：0.600 mL/min，进样量：2.00 µL。

优选的，步骤（2）中，所述质谱条件还包括：用于定量的离子反应分别为：m/z350.2→108.2（头孢拉定），碰撞能量：29 eV和m/z384.2→298.1（泰比培南），碰撞能量：25eV。

本发明的有益效果：