[发明专利]一种基于DNA微条形码技术的有毒鹅膏菌物种鉴定方法及应用有效
申请号: | 202010482446.8 | 申请日: | 2020-06-01 |
公开(公告)号: | CN111575397B | 公开(公告)日: | 2022-05-03 |
发明(设计)人: | 陈颖;邢冉冉;白文明;姬庆龙;张九凯 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 dna 条形码 技术 有毒 鹅膏菌 物种 鉴定 方法 应用 | ||
1.一种基于DNA微条形码技术的有毒鹅膏菌属物种鉴定方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)提取待测样品的基因组DNA;
2)以步骤1)中提取的DNA作为模板,使用自主设计的引物MiniITS-39F和MiniITS-278R进行PCR扩增反应,引物名称及序列为:
正向MiniITS-39F:CCGTAGGTGAACCTGYGGA;
反向MiniITS-278R:TCGCTGYRTTCTTCATCGA;
3)使用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,将PCR产物纯化后进行测序;
4)将测序结果在NCBI数据库中与参考序列进行比对,选取序列相似度在98%以上,相似度最高的物种作为所测样品的物种信息;
该方法用于分析鹅膏菌或误食后的呕吐物,所述方法为非诊断目的。
2.一种引物对在制备基于DNA微条形码技术鉴定有毒鹅膏菌属物种的试剂中的应用,其特征在于,所述引物对的序列为:
正向MiniITS-39F:CCGTAGGTGAACCTGYGGA;
反向MiniITS-278R:TCGCTGYRTTCTTCATCGA。
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