[发明专利]一种那格列汀对映异构体的检测方法

说明书

本发明公开了一种那格列汀对映异构体的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备；（2）对照溶液的制备；（3）系统适用性试验溶液的制备；（4）检测条件及系统适用性试验：采用CHIRALCEL OD‑H手性柱，以正己烷‑乙醇‑甲醇‑二乙胺为流动相；取步骤（3）制备的系统适用性试验溶液进行系统适用性试验；（5）那格列汀对映异构体测定：取步骤（1）所制备的供试品溶液及步骤（2）所制备的对照溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录供试品溶液中对映异构体峰面积及对照溶液中主峰面积，以自身对照法计算对映异构体的含量。本发明测定方法简便、快捷、高效、准确度高，分离效果良好。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种那格列汀对映异构体的分离检测方法。

背景技术

那格列汀，英文名Anagliptin，化学名为N-[2-(2-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-2-氧代乙基] 氨基)-2-甲基丙基]-2-甲基吡唑[1, 5-a]嘧啶-6-氨甲酰基，是由日本株式会社三和化学研究所研究开发的二肽基肽酶-4（DPP-4）抑制剂，可选择性抑制DPP-4。胰高血糖素样肽-1（GLP-1）以及葡萄糖依赖性促胰岛素激素（GIP）是进食后消化道分泌的肠促胰岛素，在维持糖代谢平衡方面起着重要作用。GLP-1是生理上最重要的肠促胰岛素，具有葡萄糖依赖性促进胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、抑制胃排空能力、抑制食欲等作用。另外，可在动物模型上改善胰岛β细胞功能。但是，分泌的肠促胰岛素可被在生物体内广泛分布的分解酶DPP-4分解失活，而那格列汀具有较强的DPP-4阻碍活性、化学稳定性和优异的酶选择性，因此对糖尿病(特别是II型糖尿病)具有较好的疗效。

日本株式会社三和化学研究所的发明专利WO2004/067509披露了那格列汀及其制备方 法。但同时那格列汀也是一种手性药物，存在立体异构现象，具有R构型和S构型，其结构式分别如下所示：

因此，那格列汀中往往会存在少量的R型对映异构体，检测和分离出那格列汀对映异构体（R构型），可以保证那格列汀产品的有效性和安全性。目前暂无那格列汀对映异构体的有效检测方法，无法确定那格列汀产品的质量，而高效液相色谱法具有简便、高效、准确度高等优点，因此，本发明提供了一种采用高效液相色谱仪测定那格列汀中对映异构体含量的方法，可有效地检测出那格列汀产品中对映异构体的含量，更好地控制和掌握产品质量，提高了临床用药的安全性。

发明内容

本发明针对背景技术中的不足，提供了一种那格列汀对映异构体的检测方法，具有简便、高效和准确度高等优点，可准确反映那格列汀原料药中对映异构体的含量，从而能够更好地控制和掌握产品质量，并提高临床用药的安全性。

为实现上述目的，本发明技术解决方案如下：

一种那格列汀对映异构体的检测方法，包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：精密称取那格列汀待测样品5mg~50mg，以乙醇为溶剂配制成浓度为0.5mg/mL的溶液，作为供试品溶液；

（2）对照溶液的制备：精密量取步骤（1）中的溶液1.0mL，置于100mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；

（3）系统适用性试验溶液的制备：精密称取那格列汀及其对映异构体1mg~30mg，以乙醇为溶剂配制成浓度为50µg/mL的溶液，作为系统适用性溶液；

（4）检测条件及系统适用性试验：采用CHIRALCEL OD-H手性柱，以正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺为流动相；取步骤（3）制备的系统适用性试验溶液进行系统适用性试验；

（5）那格列汀对映异构体测定：取步骤（1）所制备的供试品溶液及步骤（2）所制备的对照溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录供试品溶液中对映异构体峰面积及对照溶液中主峰面积，以自身对照法计算对映异构体的含量。