[发明专利]不动杆菌苯酚羟化酶基因、其编码蛋白及其克隆方法和载体、宿主细胞在审
| 申请号： | 202010488211.X | 申请日： | 2020-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN112063636A | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 朱晨光;王炼;章琰;马文 | 申请（专利权）人： | 上海大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/10;C02F3/34;C12R1/19;C02F101/34 |
| 代理公司： | 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 | 代理人： | 顾勇华 |
| 地址： | 200444*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 不动 杆菌 苯酚 羟化酶 基因 编码 蛋白 及其 克隆 方法 载体 宿主 细胞 | ||
【权利要求书】：
1.一种不动杆菌苯酚羟化酶基因，其特征在于：该基因的序列为SEQ ID NO.1所示的碱基序列。
2.一种根据权利要求1所述不动杆菌苯酚羟化酶基因编码的蛋白，其特征在于：其蛋白的序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
3.一种重组表达载体，其特征在于：含有权利要求1所述不动杆菌苯酚羟化酶基因。
4.一种宿主细胞，其特征在于：该宿主细胞含有权利要求3所述重组表达载体。
5.一种权利要求1所述不动杆菌苯酚羟化酶基因的克隆方法，其特征在于，步骤如下：参考NCBI数据库中的不动杆菌属细菌的苯酚羟化酶基因的序列，设计了特异引物，从自行保藏的不动杆菌细菌菌株基因组DNA中扩增，得到苯酚羟化酶基因；
所述引物为：BP1F:5’-ATGACTTTAGAAATTAAAAC-3’和BP1R:5’-TTATATCGCGGCGTCGCAGC-3’。
6.根据权利要求5所述不动杆菌苯酚羟化酶基因的克隆方法，其特征在于：所述PCR扩增的条件为：94℃，5分钟；94℃，50秒，53℃，50秒，72℃，1分10秒，28个循环；72℃8分钟。
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