[发明专利]小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂，包含抗原表位组合物和佐剂，抗原表位组合物包括7条CT26 CD8 T细胞表位的多肽片段(如SEQ ID NO：1‑7所示)与4条CT26 CD4 T细胞表位的多肽片段(如SEQ ID NO：8‑11所示)。为改进其他CT26肿瘤疫苗的治疗效果的新途径，提高了肿瘤生长的抑制效果，适合用于其他类型的抗肿瘤药物的联合治疗进行探索。本发明同时还公开了该多肽疫苗制剂的制备方法，包括：肿瘤新生抗原预测、筛选、鉴定、多肽疫苗制剂开发、多肽疫苗制剂体内药效测试和药效动力学测试。

技术领域

本发明属于免疫治疗领域，特别涉及一种治疗性肿瘤疫苗，具体涉及小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂；此外，本发明还涉及该小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂的制备方法。

背景技术

肿瘤一直是人类健康的最大威胁之一，其发病机制复杂，患者人群庞大，已成为我国死亡率最高的疾病。面对严峻的恶性肿瘤挑战，许多制药公司纷纷投身于肿瘤治疗药物的开发，肿瘤治疗药物市场近年来呈规模性快速扩张态势。在迅速扩张的抗肿瘤治疗市场中，肿瘤免疫治疗药物药众人瞩目，其中免疫检查点抑制剂和肿瘤疫苗药物在临床研究中取得了终点进展。目前肿瘤疫苗与其他类型的肿瘤治疗药物特别是免疫检查点抑制剂联合用药是一个主要的趋势。但是目前临床前的肿瘤疫苗和其他类型的肿瘤治疗药物的联合治疗的临床前评估手段非常缺乏，主要是缺乏合适的肿瘤模型和有效的肿瘤抗原制剂，严重阻碍了临床实验的设计和决策。在结直肠癌治疗性肿瘤疫苗临床前研究方面，目前没有开发出一个具有良好疗效的肿瘤疫苗制剂，严重地阻碍了结直肠癌肿瘤疫苗的研发，使得难以进行肿瘤疫苗和其他种类治疗药物联合治疗临床实验的设计和决策，比如化疗药物、小分子靶向治疗药物和抗体等。为了解决这两个问题，我们建立了肿瘤疫苗发现平台，建立肿瘤新生抗原预测、筛选、和鉴定的能力。我们采用一种特别的肿瘤疫苗组合策略，将预测出来的新生抗原制作成一种有效的结肠癌肿瘤CT26多肽疫苗制剂，在CT26肿瘤模型的治疗中取得了巨大的疗效，为临床前的肿瘤疫苗和其他类型的肿瘤治疗药物，特别是疫检查点抑制剂联合治疗提供了一个可靠的评估模型。此外，目前的治疗性肿瘤疫苗多为能够引起CD8T细胞反应MHCI限制性的新生抗原片段，抗肿瘤免疫的效果一般。越来越多研究表明由MHCII限制性的新生抗原产生的CD4 T细胞能够增强CD8 T细胞的抗肿瘤能力。因此在我们筛选到能够引起CD8 T细胞反应MHCI限制性的新生抗原片段之后，我们引入了已知的CT26肿瘤细胞CD4 T细胞表位，做成CT26肿瘤多肽疫苗制剂，用于CT26肿瘤模型的治疗。CT26肿瘤多肽疫苗制剂治疗取得了重大的治疗效果，为临床前的肿瘤疫苗和免疫检查点抑制剂等药物的联合治疗提供了一个可靠的设计和决策手段。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一在于提供小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂。

本发明要解决的技术问题之二在于提供该小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

在本发明的一方面，提供一种小鼠CT26结直肠癌治疗性肿瘤多肽疫苗制剂，所述多肽疫苗制剂中包含：

a.抗原表位组合物，所述抗原表位组合物包括7条CT26 CD8 T细胞表位的多肽片段与4条CT26 CD4 T细胞表位的多肽片段；所述7条CT26 CD8 T细胞表位的多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1-7所示；所述4条CT26 CD4 T细胞表位的多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：8-11所示；

b.佐剂。

作为本发明优选的技术方案，所述佐剂为聚肌苷酸-聚胞嘧啶核苷酸(polyinosine-polycytidylic acid，poly I:C)，或者所述佐剂为完全弗氏佐剂CFA。

在本发明的另一方面，提供所述的多肽疫苗制剂的制备方法，包含以下步骤：