[发明专利]一种低分量海参活性肽的提取方法

说明书

本发明公开了一种低分量海参活性肽的提取方法，其经过以下步骤：a.原料处理；b.原料脱色；c.酶解；d.多肽分子分级分离和纯化；e.干燥。本发明利用超临界技术脱除色素和脂肪，通过切向流过滤技术分级分离活性肽并纯化，经低温超微粉碎耦合真空干燥获得低分子量海参活性肽。本发明可以快速的对海参活性肽进行提取，提取的海参活性肽纯度高，分子量低且均一性好，生物活性高，易于被人体消化吸收，并且原料利用率高，节约资源，提取耗时较短，制作方法简单。

技术领域

本发明涉及肽的提取制备，具体为一种低分量海参活性肽的提取方法。

背景技术

世界各大洋均有海参分布，种类最多的是印度—西太平洋区，尤其是食用海参，大多分布在热带珊瑚礁内。我国北方只有一种食用海参，即刺参，而海南岛和西沙群岛却产有十几种食用海参。食用海参大多生活于潮间带或浅海。海参为狭盐性动物，在半咸水或低盐海水中很少见。对水质的污染也很敏感，在污染的海水里，海参难以生存。

多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物，由两个及以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物，通常由10-100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，活性肽对人体的生长、发育、免疫调节和新陈代谢有促进作用，但低分子量海参肽更易吸收且活性最显著，目前海参肽的种类很多，低分子量的海参肽由于提取效率低、操作复杂、成本高，未形成有效的产品，如何制备低分量海参活性肽，成为我们需要解决的问题。

发明内容

为了克服现有低分子量海参肽制备存在提取效率低、操作复杂的不足，本发明的目的在于提供一种提取效率高、操作简便的低分量海参活性肽的提取方法。本发明针对海参资源，利用超临界技术脱除色素和脂肪，通过切向流过滤技术分级分离活性肽并纯化，经低温超微粉碎耦合真空干燥获得低分子量海参活性肽。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种低分量海参活性肽的提取方法，其特征在于：其经过以下工艺步骤：

a. 原料处理：选取海参，将海参粉碎成条状；

b. 原料脱色：将条状海参进行超临界萃取技术脱色处理；

c. 酶解：配制水解酶溶液与脱色的海参进行混合，并在一定酶解条件下酶解；

d. 多肽分子分级分离和纯化：采用切向流超滤并进行多肽分子分级分离和纯化；

e. 干燥：采用低温超微粉碎耦合真空干燥制备成低分量海参活性肽。

作为优选的方法，步骤b中，超临界脱色条件为：乙醇做携带剂用量为50-60ml/500g海参原料，压力22-25MPa，温度45-50℃，二氧化碳流速12-15kg/h。

作为优选的方法，步骤c中，所述的水解酶包括碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶。

作为优选的方法，步骤c中，所述的酶解条件为：调整pH值至7.5-9，按照酶与海参的重量比为1：150-200添加碱性蛋白酶，在55-62℃条件下酶解2-4小时，将酶解后的反应溶液在105℃水浴中灭酶15分钟，然后调pH值至5.5-6.0； 然后按酶与混合溶液的重量比1：45-60添加复合蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶组成的复合酶，在45-58℃条件下酶解2-3小时，将酶解后的反应溶液在105℃水浴中灭酶15分钟，最后将酶与混合溶液的重量比为1：60-80添加木瓜蛋白酶，在52-55℃条件下酶解1-3小时，将酶解后的反应溶液在105℃水浴中灭酶15分钟。

作为优选的方法，步骤d中，所述的切向流超滤采用分别截留平均分子质量为10000u、3000u和1000u的膜。

作为优选的方法，步骤e中，所述的低温超微粉碎耦合真空干燥是低温超微粉碎机工作温度-20--15℃，超微粉碎机腔体真空度为70-90Pa。