[发明专利]一种溶栓酶的制备及其应用在审
| 申请号： | 202010492435.8 | 申请日： | 2020-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN111690634A | 公开（公告）日： | 2020-09-22 |
| 发明（设计）人： | 谭正怀;张秀 | 申请（专利权）人： | 四川省中医药科学院 |
| 主分类号： | C12N9/54 | 分类号： | C12N9/54;C12N15/70;A61K38/16;A61P9/00;A61P9/10;A61P7/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 | 代理人： | 申星宇 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 溶栓酶 制备 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤
A从具有纤溶活性贝莱斯芽孢杆菌9912D提取基因组DNA。
B将所述基因组DNA的AprE9912D基因插入到pDE1表达载体中。
C对所述表达载体进行培养添加IPTG以提高大肠杆菌产生溶栓酶粗制品的能力或效率，然后经提取、分离、纯化获得所述溶栓酶。
2.据权利要求1所述一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，利用以下引物对来自贝莱斯芽孢杆菌9912D的AprE9912D基因进行扩增:
3.根据权利要求1所述一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，培养液经离心分离后，所述溶栓酶包括可溶性溶栓酶和不可溶溶栓酶，不可溶溶栓酶需通过复性后才具有纤溶活性，所述溶栓酶与复性剂按照体积比为1：10-50进行添加。
4.根据权利要求1所述一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，在溶栓酶的上清液加入固体硫酸铵按重量比为1：1-10进行添加后沉淀分离，沉淀再经溶解、透析和凝胶分离后制取得到纯化溶栓酶制剂。
5.根据1-4所述一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，所述溶栓酶在心脑血管疾病的应用。
6.根据1-5所述一种溶栓酶的制备方法，其特征在于，所述溶栓酶可以制备成针剂或口服制剂。
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