[发明专利]研究METTL3或14介导m6A修饰调控EC转移的方法

权利要求书

1.研究METTL3或14介导m6A修饰调控EC转移的方法，其特征是包括以下步骤：

1)在临床水平实验研究METTL3、METTL14、HNRNPG、m6A、ERaD7在EC患者中表达的多态性；

2)在细胞模型中实验研究METTL3、METTL14调控m6A修饰及HNRNPG功能在肿瘤转移中的作用；

3)在PDX小鼠模型中实验研究调控METTL3/METTL14影响EC肿瘤干细胞成瘤、转移的能力。

2.如权利要求1所述的研究METTL3或14介导m6A修饰调控EC转移的方法，其特征是所述的步骤1)包括：

①采集实验组和对照组组成的外周血样本，以及新鲜组织样本和石蜡包埋样本组成的组织样本；

②测定外周血、新鲜组织、CSC细胞中的m6A水平；

③分离EC肿瘤组织中的CSC细胞；

④测定外周血、新鲜组织及CSC中METTL3、METTL14、HNRNPG及ERaD7的mRNA表达水平；

⑤测定新鲜肿瘤组织及分离的CSC中METTL3、METTL14、HNRNPG蛋白表达及下游AP-1、SP-1、NF-kB通路激活水平；

⑥测定石蜡组织样本中METTL3、METTL14、HNRNPG及ERaD7的mRNA表达水平；

⑦在石蜡组织样本中对于METTL3、METTL14、HNRNPG的免疫组化染色或免疫荧光染色；

⑧进行数据统计分析。

3.如权利要求1所述的研究METTL3或14介导m6A修饰调控EC转移的方法，其特征是所述的步骤2)包括：

①进行实验细胞分组及基因敲减、过表达处理；

②进行细胞增殖试验；

③进行球体成型试验；

④进行软琼脂糖克隆成型试验；

⑤进行药敏试验；

⑥进行细胞迁移和侵袭试验；

⑦进行紫外交联核糖核酸免疫沉淀紫外交联甲基化RNA免疫沉淀结合RNA二代测序及验证；

⑧进行数据统计分析。

4.如权利要求1所述的研究METTL3或14介导m6A修饰调控EC转移的方法，其特征是所述的步骤3)包括：

①进行实验分组及细胞处理；

②进行原代肿瘤细胞移植小鼠模型构建及移植实验；

③进行肿瘤组织获取及分析；

④进行CSC流式细胞分析及分离；

⑤进行数据统计分析。