[发明专利]一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法

权利要求书

1.一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

（1）将人脂肪组织样品用含有青霉素和链霉素的D-Hank’s溶液进行清洗，并剪碎；

（2）向步骤（1）处理后的样品中等体积分别加入含有青霉素酶的D-Hank’s溶液和Ⅰ型胶原酶溶液，37℃恒温水浴锅内消化60 min，消化结束后离心弃去上清液；

（3）向步骤（2）获得的样品中加入培养液吹打细胞沉淀，细胞筛过滤，更换培养液，于37℃、体积分数为5%的CO₂饱和湿度条件下培养24h后，当细胞生长至70%~80%融合时，将获得的脂肪间充质干细胞体外传代培养。

2.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（1）中剪碎人脂肪组织样品采用的工具为虹膜剪。

3.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（1）中人脂肪组织样品剪碎的程度为糊状。

4.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（2）中加入的D-Hank’s溶液中的青霉素酶浓度为10 U/ml。

5.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（2）中加入的Ⅰ型胶原酶溶液的浓度百分比为0.15%。

6.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（3）中培养液为含体积分数为12%胎牛血清、100×双抗的HG-DMEM培养基。

7.根据权利要求1所述的一种从人脂肪组织中高效获取原代间充质干细胞的方法，其特征在于：所述步骤（3）中获得的脂肪间充质干细胞用0.25%胰蛋白酶和生理盐水以1：1.5比例混合的混合液进行消化传代。