[发明专利]一种树脂固定化海洋环糊精葡萄糖基转移酶的方法在审
申请号: | 202010498247.6 | 申请日: | 2020-06-04 |
公开(公告)号: | CN111607584A | 公开(公告)日: | 2020-09-01 |
发明(设计)人: | 郝建华;王伟;孙晶晶 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N11/091 | 分类号: | C12N11/091;C12N9/10 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 梁正贤 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 树脂 固定 海洋 环糊精 葡萄 糖基转移酶 方法 | ||
1.一种海洋环糊精葡萄糖基转移酶的固定化方法,其特征在于所述方法具体如下:
(1)载体活化选择氨基功能树脂MI-BSI作为载体,载体在固定化前经以下步骤处理进行活化:载体加入0.1M pH 8.0的PBS缓冲液浸泡清洗1h后过滤抽干,载体与PBS缓冲液的质量体积比为1:4,比例的单位为g/ml,再加入等体积的加入含有2%戊二醛的0.1M pH8.0PBS缓冲液,25℃缓慢搅拌1h后过滤,用去离子水洗涤载体3-5次,冻干,得到活化的载体;
(2)固定化准确称取活化好的树脂MI-BSI,加入浓度为0.067mg/mL的CGTase酶液中,酶液由pH 9的甘氨酸-氢氧化钠缓冲液配制,活化好的树脂MI-BSI与CGTase酶液的质量体积比为10:1,比例的单位为mg/ml,在35℃,200rpm的摇床中固定化8小时。
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