[发明专利]一种基于UPLC指纹图谱和化学计量法的甘草产地判别方法

说明书

本发明公开了一种基于UPLC指纹图谱和化学计量法的甘草产地判别方法，采用UPLC建立了甘草不同产地、不同提取物的指纹图谱，并将指纹图谱与SA、HCA、PCA、OPLS‑DA等化学计量学方法相结合，筛选出对甘草质量评价有重要影响的特征标记化合物，然后采用UPLC/Q‑TOF‑MS对特征标记化合物进行鉴定，并对7个峰进行了定量测定。最后，利用判别分析法模拟甘草产地的判别函数方程，追踪药材产地。本发明方法不仅为甘草药材或其他相关食品药品的质量、提取方法及开发利用提供了有价值和潜在的参考，同时，也为甘草药材产地溯源及质量鉴定提供了参考和依据，通过判别函数方程即可快速、有效地鉴别甘草药材的产地，正判率高，适合推广应用。

技术领域

本发明涉及中药成分研究技术领域，具体涉及一种基于UPLC指纹图谱和化学计量法的甘草产地判别方法。

背景技术

道地药材，又称为地道药材，是优质中药材的代名词，是指药材质优效佳。道地药材是经过中医临床长期应用优选出来的，产在特定地域，与其他地区所产同种中药材相比，品质和疗效更好，且质量稳定，具有较高知名度的中药材，是传统的中医中药学中控制中药材质量的一项独特的综合判定标准。

甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)在我国是世界上记录和研究最早的国家，首载于东汉的《神农本草经》。已被传统医学用于多种用途，例如：益气补中、清热解毒、祛痰止血等功效。甘草在《本草纲目》草部中排位第一，是“解七十二毒”的调和药。不同产地的气候环境、土壤条件的变化可能导致甘草内在品质的差异。甘草主要分布于新疆、内蒙古、甘肃的河西走廊，陇西的周边，宁夏部分地区。生长于这些地区的甘草与其他地区所产同种甘草药材相比，品质和疗效更好，且质量稳定，具有较高知名度。然而市场上广泛存在以次充好、假冒伪劣的现象，不仅严重影响了甘草道地药材的声誉和品牌价值，更是有可能在用于治疗病情时危害人体健康。但目前还未有能有效鉴别甘草药材产地的快速分析方法。因此，急需研究一种能够鉴别甘草药材源产地的方法，判定药材是否为道地药材，并对其进行质量控制。

发明内容

为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种基于UPLC指纹图谱和化学计量法的甘草产地判别方法，该方法为甘草药材产地溯源及质量鉴定提供了参考和依据，正判率高，适合推广应用。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种基于UPLC指纹图谱和化学计量法的甘草产地判别方法，包括以下步骤：

(1)收集各产地的甘草药材，采用超高效液相色谱法建立甘草不同产地、不同提取物的指纹图谱；所述甘草药材采自新疆、甘肃和内蒙古；所述提取物为甘草醇提物和甘草水提物；

(2)利用相似性分析SA、层次聚类分析HCA、主成分分析PCA和正交偏最小二乘判别分析法OPLS-DA筛选特征标记化合物；

(3)采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱对特征标记化合物进行鉴定，并采用超高效液相色谱法进行定量分析；

(4)采用Wilk's lambda法进行逐步判别分析，得到甘草不同产地、不同提取物的判别函数方程，对甘草药材产地进行判别；

甘草不同产地醇提物的判别函数方程为：

Y新疆＝7.629S₁+3.029S₂-0.404S₃+663.007S₄+1765.007S₅+0.537S₆-82.594；

Y甘肃＝8.026S₁+3.36S₂-1.452S₃+830.744S₄+1857.135S₅+0.619S₆-95.093；