[发明专利]一种人体尿液中磷系阻燃剂及其降解产物的检测方法

说明书

本发明公开一种人体尿液中磷系阻燃剂及其降解产物的检测方法，包括样本预处理步骤、固相萃取的步骤、定容的步骤、液相色谱的步骤和标准曲线的绘制步骤。本发明提供了一种人体尿液中磷系阻燃剂及其部分降解产物的检测方法，从而为人体尿液中磷系阻燃剂的调查、风险评估等提供参考。该发明方法操作简单，过程简便，能够在尽可能节约试剂的同时达到最佳萃取效果，同时保证了较高的回收率和数据的准确性。

技术领域

本发明涉及磷系阻燃剂及其降解产物的检测方法领域，特别是一种人体尿液中磷系阻燃剂及其降解产物的检测方法。

背景技术

有机磷系阻燃剂(organophosphate flame retardants，OPFRs)因其低烟、低毒、高耐热性的特性被广泛应用于电子产品、泡沫、塑料和纺织品中。由于有机磷系阻燃剂主要通过添加方式而非化学键的方式加入到材料中，容易通过产品磨损、挥发和渗透的方式从处理后的材料中浸出，释放到各环境介质中，从而对人类和各生物体造成影响。研究学者们在生物体内和各环境介质均检出不同浓度的OPFRs。已有研究表明有机磷系阻燃剂会产生诸如生物毒性、潜在致癌性和神经毒性等多种毒性效应，降低机体的免疫力。例如TPHP(磷酸三苯基酯)会抑制人体血液中单核细胞羧酸酶酯活性，进而对人体免疫系统产生不良影响。TCP具有潜在的生物毒性和中枢神经毒性，可通过吞食和皮肤接触的方式进入人体产生毒害。TBOEP会对生物的内分泌系统产生干扰效应。因此针对OPFRs对人体健康的影响研究逐渐引起学者们的关注，而尿液由于其易收集，样本量大的特点，是应用最为广泛的一种人体健康监测材料。

人体尿液中有14种磷系阻燃剂和3种代谢产物，分别为磷酸三乙酯(TEP)，磷酸二乙酯(DEP)，磷酸三丙酯(TPP)，磷酸三丁酯(TBP)，磷酸三戊酯(TNP)、磷酸三辛酯(TEHP)、磷酸三间甲苯酯(TMCP)、、磷酸二苯甲苯酯(CDP)、磷酸三(2-丁氧基乙基)酯(TBOEP)、三苯基氧化膦(TPPO)和2-乙基己基二苯基磷酸酯(EHDPP)、磷酸三苯基酯(TPHP)、间苯二酚四苯基磷酸酯(RDP)和磷酸三异丁酯(TIBP)14种磷系阻燃剂，双(2-丁氧乙基)-2-(3-羟丁氧基)乙基磷酸三酯(BHEPT)、双(2-丁氧乙基)-2-羟乙基磷酸三酯(BHP)、双(丁氧基乙基)磷酸酯(BBP)3种磷酸三(2-丁氧基乙基)酯(TBOEP)磷系阻燃剂降解产物，在分析国内文献中关于人体尿液中磷系阻燃剂含量报道的基础上，利用磷酸三正丁酯-d₂₇(TBP-d₂₇)、三(2-丁氧乙基)磷酸酯-d₂₇(TBOEP-d₂₇)作为标准替代物内标指示物。

目前已有少数学者开展了尿液中OPFRs的研究，但是现有的尿液中OPFRs的检测方法目标物少，而同时研究尿液中OPFRs及其代谢产物的检测方法则更少。中国专利公开号CN105699527A公开了血清中溴系阻燃剂和磷系阻燃剂含量的检测方法可供参考，该专利申请文件中，血清中磷系阻燃剂含量的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：

(1b)将待测血清与硅藻土混合，加入内标指示物，然后加入第一有机溶剂提取血清中的溴系阻燃剂，充分提取后得到提取液；

(2b)将步骤(1b)得到的提取液浓缩后，转移至固相萃取柱上进行净化，用第二有机溶剂将磷系阻燃剂从固相萃取柱上洗脱出来，收集洗脱液后进行浓缩；将浓缩后的洗脱液转移至复合氧化铝-硅胶柱进行进一步净化，用第二有机溶剂再次洗脱，将再次洗脱出的洗脱液定容；

(3b)配制含有步骤(1b)中所述内标指示物的磷系阻燃剂标准溶液，然后将步骤(2b)定容后的溶液和含有内标指示物的磷系阻燃剂标准溶液用气相色谱-质谱仪进行测定，基于内标法进行数据处理和定量分析后，获得血清中磷系阻燃剂的含量。

该检测方法能够很好地检测血清中磷系阻燃剂，为新型污染物的人体暴露风险评估提供了有效的方法手段。

但是目前还没有进行人体尿液中磷系阻燃剂及其降解产物的检测方法，毕竟人体尿液比人体血清更易获得。