[发明专利]深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法

权利要求书

1.一种深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(a)预处理：取深部真菌感染标本进行处理，收集包含真菌及代谢产物的混合物；

(b)真菌培养：使用细胞针将混合物转移至真菌血培养瓶中，利用血培养仪进行常规真菌培养；

(c)收集真菌孢子：将真菌血培养瓶中呈阳性的混合物离心、弃上清液，将沉淀物转移至内设有孔径为10μm生物过滤膜的2mL无菌EP管中，高速离心，收集真菌孢子。

2.根据权利要求1所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述步骤(c)中离心的条件为：5000rpm离心5min；所述高速离心的条件为：14000rpm离心10min。

3.根据权利要求1所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述深部真菌感染标本为深部真菌感染组织、深部真菌感染体液以及肺泡灌洗液中的一种。

4.根据权利要求3所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述深部真菌感染组织的处理方法为：在无菌条件下，对深部真菌感染组织剪切研磨，将剪切研磨后的组织混合物经300目尼龙网过滤，使用0.01mol/L PBS溶液洗涤、过滤，之后转移至离心管中，加入5mL红细胞裂解液重悬，离心，弃上清液，将沉淀的混合物转移至真菌血培养瓶中。

5.根据权利要求4所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述离心的条件为：1500rpm离心15min。

6.根据权利要求3所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述深部真菌感染体液的处理方法为：取血液、脑脊液、胸水、腹水、胆汁以及引流液中的一种，离心后，弃上清液，采用细胞针将沉淀的混合物转移至真菌血培养瓶中。

7.根据权利要求6所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述离心条件为4000rpm离心5min。

8.根据权利要求3所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述肺泡灌洗液的处理方法为：取20μL肺泡灌洗液做细胞涂片，通过显微镜筛选出合格的标本；将合格的标本经300目尼龙网过滤，过滤液转移至离心管中离心，弃上清液，用细胞针将沉淀的混合物转移至真菌血培养瓶中。

9.根据权利要求8所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述合格标本为上皮细胞的总数占比不超过3％，红细胞的总数占比不超过10％。

10.根据权利要求8所述的深部真菌感染标本中收集真菌孢子的方法，其特征在于：所述离心的条件为：1500rpm离心15min。