[发明专利]一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法有效
申请号: | 202010505417.9 | 申请日: | 2020-06-05 |
公开(公告)号: | CN111675743B | 公开(公告)日: | 2023-10-27 |
发明(设计)人: | 张萍;陈德刚 | 申请(专利权)人: | 宁夏泰益欣生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07H17/08 | 分类号: | C07H17/08;C07H1/06 |
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地址: | 750205 宁夏回族自治*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杀菌 发酵 提取 方法 | ||
1.一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于其工艺步骤为:
(1)预处理
将多杀菌素发酵液加水稀释,后加入内肽酶和尿素,充分搅拌后静置处理,再加入氧化钙调节pH至8~10,充分搅拌后用磷酸调节pH至3~5;
(2)提取
在预处理后的多杀菌素发酵液中加入四氢吡喃,充分搅拌后静置处理,然后板框过滤,得到多杀菌素混合溶液;
(3)固液分离
用氢氧化钠溶液调节多杀菌素混合溶液pH至8~10,固液分离得到多杀菌素粗品;
(4)水洗、溶解
将多杀菌素粗品用氢氧化钠溶液水洗,之后再加入纯化水溶解,用磷酸调节pH至3~5;
(5)膜过滤
采用卷式超滤膜过滤,得到多杀菌素溶液;
(6)结晶、干燥
向多杀菌素溶液中加入氢氧化钠溶液,当溶液出现浑浊现象时加入晶种多杀菌素成品,调节pH至9~10,静置处理,后过滤、干燥得到多杀菌素。
2.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述稀释用水量为多杀菌素发酵液体积的10~20%,所述内肽酶用量为0.1~0.3kg/m3,所述尿素用量为5~10 kg/m3;所述搅拌时间20~40min,静置处理时间150~190min。
3.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述四氢吡喃用量为多杀菌素发酵液体积40~60%;所述搅拌时间20~40min,静置处理时间120~160min。
4.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述水洗时间20~30min;所述溶解是指加入纯化水溶解至溶液浓度20~40%。
5.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述超滤采用错流超滤,期间控制压力0.3~0.6MPa,膜通量80~100L/m2.h,其中所用卷式超滤膜的截留物质分子量为1000以上,膜材质是聚苯乙烯塑料。
6.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于,步骤(6)中,所述晶种多杀菌素成品的加量为多杀菌素粗品质量的0.1~0.5%。
7.按照权利要求1所述的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法,其特征在于所述磷酸质量浓度为20~30%;所述氢氧化钠溶液的质量浓度控制在20~30%。
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