[发明专利]一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法

说明书

本发明涉及一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法，其工艺步骤包括对多杀菌素发酵液采用内肽酶和尿素的预处理以及之后采用四氢吡喃的提取、固液分离、水洗、溶解、卷式超滤膜过滤、结晶、干燥等过程。本发明采用膜过滤工艺代替现有技术中的萃取、大孔树脂吸附或层析或离子交换工艺，取消了菌渣干燥、萃取和重结晶等工艺，在提取过程中只使用了单一的有机溶剂，同目前国内常规工艺相比，具有提取收率高，产品质量优，提取工艺简捷，生产成本低等优势，有利于增强产品的国内外市场竞争力。

技术领域

本发明属于抗生素提取技术领域，特别是涉及一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法。

背景技术

多杀菌素是放线菌刺糖多孢菌经有氧发酵产生的次级代谢产物，属大环内酯类抗生素，分子结构中含有一个二十二元内酯环、一个鼠李糖及一个福乐糖胺，在水中溶解度很小，易溶于醇类、酯类等多种极性、非极性有机溶剂。经有氧发酵后刺糖多孢菌发酵液中主要含有多杀菌素A(85～90%)和多杀菌素D(10～15%)两种活性成分，同时还含有少量B、C、E、F、H、J、K、L等多种结构类似组分。多杀菌素是一种广谱的生物农药，杀虫活性远远超过有机磷、氨基甲酸酯、环戊二烯和其它杀虫剂。

目前，国内外相关文献公开了多杀菌素提取纯化工艺，主要步骤是将多杀菌素发酵液经预处理、板框过滤得到湿菌渣，再经干燥、萃取或吸附剂吸附或大孔树脂吸附或层析或离子交换、重结晶等工艺提取得到纯化的多杀菌素，上述工艺存在的问题是：

1、以膨润土、活性炭、壳聚糖等吸附剂吸附提取，缺点是收率低，同时还会增加环保处理吸附剂的成本。

2、采用萃取方法提取，缺点是萃取周期长，萃取的收率较低，同时由于使用了较多的有机溶剂，增加了环保处理成本。

3、采用大孔树脂吸附或层析或离子交换技术提取纯化多杀菌素，存在的问题是：生产周期较长，过程中采用了大量的有机溶剂，增加了废水处理成本，提取收率不高。

4、采用重结晶工艺纯化多杀菌素，存在的问题是生产周期长，降低了收率，增加了废水处理成本。

5、产品总收率低。经试验验证，采用以上方法提取多杀菌素，收率不超过85%。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术中的缺陷，提供一种有效提高多杀菌素提取收率，降低生产成本，且提取工艺简单的从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种从多杀菌素发酵液中提取多杀菌素的方法，其特征在于其工艺步骤为：

（1）预处理

将多杀菌素发酵液加水稀释，后加入内肽酶和尿素，充分搅拌后静置处理，再加入氧化钙调节pH至8～10，充分搅拌后用磷酸调节pH至3～5；

（2）提取

在预处理后的多杀菌素发酵液中加入四氢吡喃，充分搅拌后静置处理，然后板框过滤，得到多杀菌素混合溶液；

（3）固液分离

用氢氧化钠溶液调节多杀菌素混合溶液pH至8～10，固液分离得到多杀菌素粗品；

（4）水洗、溶解

将多杀菌素粗品用氢氧化钠溶液水洗，之后再加入纯化水溶解，用磷酸调节pH至3～5；

（5）膜过滤

采用卷式超滤膜过滤，得到多杀菌素溶液；

（6）结晶、干燥

向多杀菌素溶液中加入氢氧化钠溶液，当溶液出现浑浊现象时加入晶种多杀菌素成品，调节pH至9～10，静置处理，后过滤、干燥得到多杀菌素。