[发明专利]一种针对20种人参皂苷的高分辨二级质谱筛查方法

权利要求书

1.一种针对20种人参皂苷的高分辨二级质谱筛查方法，其特征在于，包括下列步骤：

(1)、色谱条件与系统适用性试验

色谱条件：ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，100mm×2.1mm，1.7μm，样品管理器温度15℃，柱温30℃，进样体积10μL，流速为0.4mL·min-1，流动相A：0.1％甲酸水溶液，v/v；流动相B：0.1％甲酸乙腈溶液，v/v，梯度洗脱条件：0～1min，5～15％B；1～10min，15～35％B；10～14min，35～42％B；14～24min，42～80％B；24～25min，80～95％B；25～26min，95％B；26～27min，95～5％B；27～29min，5％B，

质谱条件：电喷雾离子化源，ESI，Electron Spray Ionization，负离子检测模式，全扫扫描范围为m/z 100～1200，毛细管电压2.2kV(ESI-)，锥孔气流量为50L·h-1，锥孔电压为40V，脱溶剂氮气流量为600L·h-1，脱溶剂气温度300℃，源温120℃，氩气流量0.15mL·min-1，采用甲酸钠溶液对仪器进行校正，采用亮氨酸-脑啡肽[M-H]-554.2615作为LockSpray校正标准液(100pg·mL-1)，实时校正的流速为15μL·min-1；

(2)、对照品溶液的制备

取20种人参皂苷对照品适量，加甲醇配置成对照品溶液，结果见表1；

表1 20种人参皂苷对照品信息

(3)、供试品溶液的制备

取干燥样品粉末、过60目筛，1g，，精密称定，用20mL 70％甲醇超声提取，水浴30℃，超声60min，冷却后，称量样品溶液，用70％甲醇补足损失的重量，3000rpm，离心10min，上清液过0.2μm的滤膜，取续滤液，备用；

(4)、质谱库的建立：

以上述基质标准品为样品，应用LC-MS-QTOF质谱采集条件，调节液相条件为乙腈与水的流速分别为0.15mL/min，采用等度洗脱方法，通过自动进样器采样，不接色谱柱，改用两通，采集时间2min，分别选取有代表性，具有丰富的离子碎片信息的质谱图，分别建立并储存碰撞能为20，35，50和35±15eV时的全扫描质谱图至质谱谱库，同时描述人参皂苷的名称，精确分子质量、结构式、采集条件、常规保留时间，见表2；

表2人参皂苷的质谱碎片及参数