[发明专利]基于氧化损伤碱基的荧光探针及用于直接检测DNA甲基化的试剂盒与方法

权利要求书

1.一种非疾病诊断目的的直接检测DNA甲基化的方法，其特征在于，包括：

亚硫酸氢盐处理要检测的靶DNA；

将荧光探针与亚硫酸氢盐处理过的DNA杂交，形成双链DNA；

所述双链DNA在hOGG1酶的辅助下诱导荧光探针的循环裂解；

检测荧光信号，对DNA甲基化进行定性/定量分析；

所述荧光探针的序列为：ROX-ATC CGC TCT TCC T-BHQ2，其中，带下划线的粗体G碱基表示8-oxoG修饰。

2.如权利要求1所述的直接检测DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的浓度为10^-13M至10^-9M范围内和2×10^-9M至10^-7M范围内，荧光强度与甲基化DNA的浓度对数线性关系。

3.如权利要求1所述的直接检测DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的浓度在10^-13M至10^-9M范围内时，回归方程为F＝1466+101.7log₁₀C，F是605nm处的荧光强度，C是甲基化DNA浓度。

4.如权利要求1所述的直接检测DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的浓度在2×10^-9M至10^-7M范围内时，回归方程为F＝12506+1367log₁₀C，F是605nm处的荧光强度，C是甲基化DNA浓度。