[发明专利]胚培养技术1年4代加速强冬性小麦杂交育种进程的方法

权利要求书

1.一种胚培养技术1年4代加速强冬性小麦杂交育种进程的方法，其特征在于主要包括以下操作步骤：

第一步：小麦幼胚培养技术：

将小麦杂交后代系统材料的开花期进行标记：采用彩色毛线标记开花期，即以同一天穗中部籽粒开花作为取样群体开花期一致的标准，用同一种颜色毛线绑扎穗轴基部进行标记；于花后10-15d选取开花期一致麦穗，剥取未成熟籽粒，置于4℃冰箱保存1-2d，提高小麦幼胚愈伤组织诱导率与分化率；剥下的籽粒在超净工作台上进行消毒灭菌；灭菌后的籽粒放置到无菌培养皿中，用镊子固定籽粒使其腹沟朝下，用解剖针挑出幼胚；选择直径0.8-1.2mm的完整幼胚，盾片朝上放置于无菌1/2MS培养基上，每个培养皿中均匀分布接种10-15个幼胚；接种完幼胚的培养皿置于20℃-25℃光照培养箱或人工气候室中培养，经15-20d培养后幼胚分化生长出分生组织，继续培养生根长成幼苗；

第二步：幼苗人工春化处理技术：

将培养基上培养的株高3-5cm，根系发育良好的小麦幼苗移栽种植到花盆中，移栽深度3-5cm，移栽后的花盆放置在人工气候室中培养，培养条件每24h设置光照时间7-9h，温度20-25℃、湿度55-65％培养至分蘖期，植株高度约10-15cm高，每株一般保留2-3个健壮分蘖，其余幼小分蘖从根基部剪除；将进入分蘖期的强冬性小麦苗转移至光照培养箱中，模拟强冬性小麦在田间自然条件下的春化过程进行人工春化；将分蘖期强冬性小麦放入光照培养箱中变温培养；调节培养箱运行模式如下：白天光照模式持续时间7-9h，温度保持在5-7℃；夜晚无光模式持续时间15-17h，温度保持在2-4℃，湿度控制在60-65％；人工春化处理变温培养期间每隔5-7d浇水一次，每隔5-7d剪除多余分蘖一次，每株一般固定长期保留2-3个健壮分蘖，每隔12-14d追施氮磷钾复合肥一次；当培养至植株基部节间突起伸长时即起身拔节现象出现，即可完成人工春化处理阶段培养；

第三步：小麦植株生殖生长调控技术：

将完成人工春化处理培养至已起身拔节的强冬性麦苗移回室内培养，用植物培养的红蓝冷光源设置每24h光照时间12-16h，温度20-25℃、湿度45-55％培养，对进入生殖生长阶段的冬小麦苗每隔2-4d定时浇水一次，根据植株长势情况每8-10d施肥一次，每隔5-7d剪除多余分蘖一次，每株保留2-3个健壮分蘖；随着强冬性小麦的生长发育，分蘖数量到抽穗后会逐渐减少，并且幼小多余分蘖生长速度逐渐减慢，因此修剪多余分蘖的时间间隔可延长，进入扬花期后不再修剪，直到籽粒成熟；

第四步：杂交育种后代系统1年4代加速基因纯合技术：

强冬性小麦杂交育种，从配置杂交组合采用系谱法选育至F₂代种子产生，将F₂代中选的植株的籽粒种植到田间产生F₃代系统，取中选的F₂代株系花后10-15d穗中部籽粒，经上述胚培养技术、幼苗人工春化技术和生殖生长调控技术的培养后，强冬性小麦杂交育种高代品系全生育期由255-280d缩短至95-115d，可以实现了强冬性小麦在1年之内快速繁殖产生至F₆代。

2.如权利要求1所述的胚培养技术1年4代加速强冬性小麦杂交育种进程的方法，其特征在于在第一步当中，将剥下的籽粒在超净工作台上进行消毒灭菌，其消毒灭菌方法为：先用75％酒精浸泡2-3min，再用无菌水冲洗一遍；用0.1％HgCl₂溶液消毒浸泡8-10min，再用无菌水冲洗2-3遍，并在紫外灯下照射20-30min。