[发明专利]FL2-siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用及角膜碱烧伤药物

说明书

本发明公开了FL2‑siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用，所述FL2‑siRNA用于角膜碱烧伤后的角膜损伤疾病的急性期或早期治疗，加速角膜损伤愈合，减少损伤后并发症的出现；FL2‑siRNA制备成注射液用于角膜碱烧伤的结膜下注射，用于促进局部上皮细胞的迁移与损伤愈合。本发明治疗角膜碱烧伤药物，其特征在于：所述治疗角膜碱烧伤药物是一种含有FL2‑siRNA的注射液，包括胆固醇、甲基化修饰的siRNA、RNase free水。本发明为角膜碱性烧伤提供精准的治疗靶点，为眼碱化学烧伤的药物治疗提供理论依据。

技术领域

本发明涉及治疗角膜碱性烧伤药物的技术领域，具体说是FL2-siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用及角膜碱烧伤药物。

背景技术

视力为人类提供了关于外部世界超过85％的全部信息。眼化学伤，尤其是角膜碱性烧伤，是我国常见难治性致盲眼病,是治疗最棘手的常见病因之一。在治疗和预后方面，它比酸烧伤或机械性角膜损伤更具有破坏性。它可引起广泛的角膜新生血管化、角膜溃疡和角膜疤痕，从而导致角膜穿孔和视力丧失甚至失明，可对生活质量造成持续性的毁灭性影响。除了角膜移植之外，目前还没有有效的治疗方法，但这类患者因为严重的角膜新生血管和角膜移植的术后排斥依然非常具有挑战性的。所以研究眼碱性化学伤愈合的相关分子参与机制，寻找更有效、更经济、更精准的治疗靶点，为眼碱化学烧伤的药物治疗提供理论依据称为研究的重点，也将是一个巨大的治疗性突破。

发明内容

本发明的目的是提供一种FL2-siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用及角膜碱烧伤药物，为角膜碱性烧伤提供精准的治疗靶点，为眼碱化学烧伤的药物治疗提供理论依据。

本发明通过以下技术路线来实现：

FL2-siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用，其特征在于：所述FL2-siRNA用于角膜碱烧伤后的角膜损伤疾病的急性期或早期治疗，加速角膜损伤愈合，减少损伤后并发症的出现。

FL2-siRNA制备成注射液用于角膜碱烧伤的结膜下注射，用于促进局部上皮细胞的迁移与损伤愈合。

一种治疗角膜碱烧伤药物，其特征在于：所述治疗角膜碱烧伤药物是一种含有FL2-siRNA的注射液，包括胆固醇、甲基化修饰的siRNA、RNase free水。

所述含有FL2-siRNA的注射液中FL2基因的siRNA的碱基序列是：5'GGTCTTGGATTCTCCCTACGA 3'。

所述碱基序列5'GGTCTTGGATTCTCCCTACGA 3'通过下列生产流程得到：

第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的FL-2核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其5'-羟基的保护基团DMT，获得游离的5'-羟基；第二步，合成DNA的原料，亚磷酰胺保护FL-2核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到FL-2核苷亚磷酸活化中间体，它的3'端被活化，5'-羟基仍然被DMT保护，与溶液中游离的5'-羟基发生缩合反应；第三步，带帽反应，即缩合反应中可能有极少数5'-羟基没有参加反应，用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应，这种短片段通过在纯化时分离掉；第四步，在氧化剂碘的作用下，亚磷酰形式的FL-2核苷酸转变为更稳定的磷酸三酯；重复以上步骤，直到所有要求合成的碱基被接上去形成FL-2siRNA。

本发明相比于现有技术，明显具有以下优点：

本发明通过比较评估角膜碱性烧伤后FL2-siRNA与对照组control siRNA的再上皮化率，经过FL2-siRNA处理后角膜上皮愈合方面显著改善。FL2-siRNA可使得FL-2靶向缺失，从而增强了角膜再上皮化。

(1)可以用于角膜碱烧伤后(甚至所有角膜损伤疾病的急性期或早期治疗)，FL2-siRNA促进角膜上皮细胞的迁移，有助于损伤修复；