[发明专利]一种遗传性耳聋基因突变的试剂盒

说明书

本发明公开了一种遗传性耳聋基因突变的试剂盒，属于生物技术领域，该试剂盒用于检测遗传性耳聋基因12S rRNA、GJB2和GJB3的20位点及SLC26A4基因全外显子是否发生突变，其引物序列如SEQ ID No.1～46。本发明提供的遗传性耳聋基因突变的试剂盒用于遗传性耳聋的早期发现、诊断和早期干预康复，可广泛应用于产前诊断，降低遗传性耳聋的发病率，能够检测杂合突变与纯合突变，从而降低漏诊杂合突变携带者的概率，并且，其准确性更高。

技术领域

本发明涉及一种试剂盒，尤其涉及检测遗传性耳聋基因12S rRNA、GJB2和GJB3共3基因20位点及SLC26A4基因全外显子是否发生突变，具体涉及一种遗传性耳聋基因突变的试剂盒。

背景技术

耳聋是最常见的感觉障碍性疾病之一，可引起聋哑残疾。尽管此类疾病一般不危及生命，但是会给个人生活、家庭和社会带来沉重的负担。2006年的残疾人抽样调查显示，我国的听力残疾人约2004万，占残疾人总数的24.16％，占全国人口的1.53％。听力言语残疾者中7岁以下的聋儿达80万人并以每年新增3万聋儿的速度在增长。在每年出生的新生儿中，重度听力障碍者约占1-3‰，一名聋哑儿童的手术及康复最低以30万元计算，仅仅使7岁以下的80万聋儿回到有声世界，则至少也要花费2400亿元，造成了巨大的财政支出和社会家庭负担。耳聋中遗传因素占比例约为60％，另外在大量的迟发性听力下降患者中，亦有许多患者由于自身的基因缺陷致病，或由于基因缺陷和多态性造成对致聋环境因素易感性增加而致病，所以耳聋的基因检测对耳聋的诊断和预防至关重要。

基因诊断又称DNA诊断或分子诊断，通过分子生物学和分子遗传学的技术，直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常，从而发现遗传性疾病的基因改变，对疾病做出判断。遗传性耳聋的基因诊断可以用于(1)各种不明原因的耳聋病因诊断，包括先天耳聋和后天耳聋；(2)家族中有遗传性或不明原因耳聋的听力正常人群，检测是否为突变基因携带者；(3)已生育一耳聋后代，生育第二个后代的产前诊断；(4)需要使用氨基糖苷类抗生素前的诊断，防止“一针致聋”。

针对中国人群中常见的耳聋相关基因进行检测，包括：

(1)线粒体12S rRNA：线粒体位于细胞质中，其突变所致耳聋的传递方式呈母系遗传，家族中的母系成员均携带致病基因。部分线粒体突变者对氨基糖苷类药物有易感性，使用正常剂量或微量的药物就可以造成听力损失，即“一针致聋”。通过筛查携带线粒体突变的患者，对其未发病的母系亲属进行用药指导，能预防药物性耳聋发生。该检测还可应用于孕期母亲及新生儿筛查、氨基糖甙类药物应用前的预防性检查等。

(2)GJB2：间隙连接蛋白β2(gap junction protein,GJB2)基因为最常见的耳聋相关基因。GJB2基因的产物可以自身或与其家族成员以六聚体的形式在细胞与细胞间形成间隙连接，使相邻细胞间能够进行小分子与代谢物的交换。GJB2基因突变导致耳蜗功能障碍，临床表型复杂，从轻度直至深度耳聋都可能与GJB2基因突变相关。GJB2基因突变约占中国先天性耳聋病因的30％。因其为常染色体隐形遗传，且受计划生育的影响，大多数家族只出现单个病人。对GJB2基因进行诊断，不但可以明确部分先天性耳聋的遗传学病因，指导产前诊断，还能预测电子耳蜗移植效果。

(3)GJB3：间隙连接蛋白β3(gap junction protein,GJB3)基因是连接蛋白家族中的一个成员，GBJ3基因突变不仅可以引起显性或隐性形式遗传的感音神经性耳聋，而且还与皮肤疾病以及外周神经病有关。

(4)SLC26A4基因：SLC26A4基因突变会导致大前庭水管综合征，在耳聋人群中的突变频率位居第二位，仅次于GJB2基因。SLC26A4基因突变可以导致前庭导水管扩大，包括单纯性前庭导水管扩大或者是合并耳蜗畸形的前庭导水管扩大。临床上主要表现为高频听力损失为主的感音神经性耳聋，听力损失程度多表现为重度或者是极重度聋。