[发明专利]4种猕猴桃新病毒RT-PCR检测的引物组和试剂盒

权利要求书

1.一种利用RT-PCR反应检测猕猴桃病毒2(AcV2)、猕猴桃黄化病毒1(AcYV1)、猕猴桃黄化病毒2(AcYV2)和猕猴桃黄化环斑病毒(AYRSpV)4种猕猴桃新病毒的引物组，该引物组由如下4对引物组成：

第一对引物为AcV2正反向引物

SEQ ID NO.1：5’-AAAGAACCCTACCTCCACC-3’

SEQ ID NO.2：5’-CCATCTATATCTCAACAGCCTGCTCG-3’

第二对引物为：为AcYV1正反向引物

SEQ ID NO.3：5’-AACGCTGAGGAGAAAGGTAGG-3’

SEQ ID NO.4：5’-AAGAAAGAATAGGGTCGTGATAGTG-3’

第三对引物为：为AcYV2正反向引物

SEQ ID NO.5：5’-AGTTATGAGATTGAAGGCACCAGA-3’

SEQ ID NO.6：5’-GGTAGAAGGCGTCAAGAACAGG-3’

第四对引物为：为AYRSpV正反向引物

SEQ ID NO.7：5’-TTTGGACTGGGAACGTAGAGG-3’

SEQ ID NO.8：5’-CGAGAAAGTGAGGTTATCGGG-3’。

2.一种利用RT-PCR反应检测AcV2、AcYV1、AcYV2和AYRSpV 4种猕猴桃新病毒的试剂盒，该试剂盒包含权利要求1所述的引物组，还包含进行RT-PCR反应的试剂：浓度为0.5×-0.8×的缓冲液；浓度为0.1-0.6mM的dNTPs；浓度为1.0-4.0mM的Mg²⁺。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中缓冲液浓度为0.5×、0.6×、0.7×或0.8×；dNTPs浓度为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.5mM或0.6mM；Mg²⁺浓度为1.0mM、2mM、3.0mM或4.0mM。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，试剂盒中还包含Taq DNA聚合酶，Taq DNA聚合酶浓度为0.02U/μL-0.1U/μL。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，试剂盒中还包含M-MuLV反转录酶，M-MuLV反转录酶浓度为0.5U/μL-1U/μL。

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其中缓冲液的浓度为0.8×，dNTPs的浓度为0.6mM，Mg²⁺的浓度为4.0mM，Taq DNA聚合酶的浓度为0.1U/μL，M-MuLV反转录酶的浓度为0.1U/μL。

7.根据权利要求2所述的试剂盒，其中4对引物中每个反应加入其中的一对引物检测对应的一种病毒。