[发明专利]一种利用无机硒制备富硒屎肠球菌的方法及其应用

权利要求书

1.一种利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)准备屎肠球菌菌种、屎肠球菌培养基、亚硒酸钠；所述屎肠球菌培养基包括屎肠球菌固体培养基、屎肠球菌液体培养基

(2)向步骤(1)制备得到的屎肠球菌液体培养基中加入亚硒酸钠，溶解，采用20μm过滤膜过滤，制备得到富硒培养基；

(3)采用步骤(1)制备得到的屎肠球菌固体培养基活化屎肠球菌菌种，将活化后的屎肠球菌菌液按体积比5％-10％的比例加入富硒培养基中，培养，培养物离心，双蒸水洗涤所得沉淀，并真空冷冻干燥，制备得到富硒屎肠球菌制剂；优选的，将活化后的屎肠球菌菌液按体积比10％加入富硒培养基中。

2.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(1)所述屎肠球菌培养基为MRS培养基。

3.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(1)所述屎肠球菌固体培养基为MRS琼脂培养基，将MRS琼脂培养基粉末、蒸馏水以质量比66.2:1000混合，121℃高压灭菌15分钟制备得到；

所述屎肠球菌液体培养基为MRS肉汤培养基，将MRS肉汤培养基粉末、蒸馏水以质量比52.4:1000混合，121℃高压灭菌15分钟制备得到。

4.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(2)所述富硒培养基中硒浓度为5-20μg/mL，优选的，所述富硒培养基中硒浓度为10μg/mL。

5.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(3)所述的活化屎肠球菌菌种具体为：所述屎肠球菌菌种为屎肠球菌活菌干粉，取出屎肠球菌冻干管，将无菌水注入冻干管中，吸取菌悬液，涂布于屎肠球菌固体培养基平板上，在37℃、厌氧条件下培养24小时，活化成功后，传代1-2次，得到活化后的屎肠球菌。

6.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(3)所述培养条件为37℃厌氧条件下培养24小时，所述离心为将培养物以4000r/min离心15分钟；所述离心与洗涤步骤重复3次。

7.根据权利要求1所述的利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，其特征在于，步骤(3)所述真空冷冻干燥时间为48小时。

8.采用权利要求1至7任意项权利要求所述方法制备得到的富硒屎肠球菌制剂。

9.权利要求8所述富硒屎肠球菌制剂在提高畜禽生长性能和/或改善畜禽肠道健康和/或改善畜禽机体免疫力和/或提高畜禽的生产能力中的应用。

10.权利要求8所述富硒屎肠球菌制剂在在动物饲料添加剂中的应用，其特征在于，所述动物饲料添加剂为蛋鸡或肉鸡饲料添加剂。