[发明专利]一种利用无机硒制备富硒屎肠球菌的方法及其应用

说明书

本发明提供一种利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法，所述方法包括：(1)准备屎肠球菌菌种、屎肠球菌培养基、亚硒酸钠；所述屎肠球菌培养基包括屎肠球菌固体培养基、屎肠球菌液体培养基；(2)向屎肠球菌液体培养基中加入亚硒酸钠，溶解，过滤，制备得到富硒培养基；(3)活化屎肠球菌菌种，将活化后的屎肠球菌以5％‑10％比例加入富硒培养基中，37℃厌氧条件下在恒温摇床中培养24小时，培养物离心，双蒸水洗涤所得沉淀，真空冷冻干燥，制备得到富硒屎肠球菌制剂。富硒屎肠球菌制剂改善动物的肠道健康和机体免疫力，提高动物生产性能，而且可用于生产富硒蛋等，有利于增加畜禽产品的附加值，提高饲养者的经济收益。

技术领域

本发明属于微生物制剂生产技术领域。具体涉及一种利用无机硒制备富硒屎肠球菌制剂的方法及其应用。

背景技术

研究表明，在饲粮中添加有益肠道菌，对动物有诸多益处。一方面，有益肠道菌可以改善肠道内的菌群结构，增加有益菌的丰度，同时降低有害菌、条件性致病菌的丰度。另一方面，添加的有益肠道菌或添加有益肠道菌所诱发增加的有益菌可产生改善肠道结构、促进营养吸收的代谢物。与之相反，有害肠道菌及其代谢物则损伤肠道的结构与功能，增加进入宿主体内的细菌和毒物，引起免疫和炎症反应、营养吸收受阻等不利影响，造成动物发生疾病以及降低家养畜禽的生产性能。

在有益肠道菌中，乳酸杆菌、丁酸梭菌和芽胞杆菌是较常用的有益肠道菌，不过，它们可能对肠道健康与功能的效应不同。屎肠球菌为圆形或椭圆形，呈单个、成对或短链状排列，无芽孢、无鞭毛，是需氧或兼性厌氧的革兰氏阳性球菌。相较于双歧杆菌、乳杆菌等严格厌氧菌，屎肠球菌易于生产保存。肠球菌可产生大量乳酸，抑菌作用强，是目前市场上最常见的乳酸菌。有研究表明屎肠球菌添加到猪饲料中，可以减少断奶仔猪的腹泻，提高仔猪生长性能，减少肠道黏膜的氧化应激，维护肠道黏膜的屏障功能。在肉鸡日粮中添加屎肠球菌，可以在一定程度上降低死淘率，并促进免疫器官的发育，提高血清和肝脏中T-AOC和GSH-Px活性，降低血清中MDA含量，增加抗氧化酶活性，改善肉鸡的抗氧化应激能力。在蛋鸡日粮中添加屎肠球菌，可以提高产蛋率1.7％-4.7％，而破蛋率和料蛋比分别降低0.4％和2％-6％。平均蛋重、蛋壳强度和哈氏单位等蛋品质指标也呈上升趋势。对产蛋后期的蛋鸡而言，添加屎肠球菌能提高蛋鸡的平均蛋重、蛋料比和产蛋率，且降低鸡粪中氨气的产生量。在奶牛饲料中添加屎肠球菌，能提高泌乳量8％，降低干物质的采食量，提高饲料粗脂肪的表观消化率，有利于饲料的转化和利用，以及降低牛奶中体细胞的总数量。

硒是人和动物所必需的微量元素，硒具有重要的生理作用，在提高免疫力，调节新陈代谢，预防癌症等方面，均有着显著的作用。尤其在增强免疫力方面，适量的硒可调节机体对维生素的吸收，增加机体免疫球蛋白的生成。硒也具有抗氧化能力，是谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心元素，能够清除人和动物体内的自由基，防止细胞膜被氧化而受损，具有抗衰老的功效。研究表明，硒可有效提高动物机体内的吞噬细胞数量，影响特异性效应细胞游走趋化和吞噬细胞的杀菌活力，调节B淋巴细胞、T淋巴细胞、自然杀伤性细胞(NK)和中性粒细胞的功能，从而增强了动物机体的细胞免疫能力。在动物体中硒和维生素E有着复杂的补偿和协调的作用，可以减少细胞膜对维生素E的需求量，提高动物体对维生素E和其他营养物质的吸收利用率。硒元素在自然界有两种存在方式：有机硒和无机硒。无机硒通常指亚硒酸钠和硒酸钠。但无机硒不易被人和动物吸收，毒性较高，容易污染。和无机硒相比，有机硒拥有使用安全性高、发生中毒率低、人体和动物体吸收转化率高、营养价值更高等特点。有机硒通常以硒核酸、硒蛋白、硒多糖、硒代蛋氨酸等形式存在。利用微生物的自我快速复制能力，将无机硒转化成菌体中的有机硒，目前也是生产有机硒的一种廉价有效方法。

由于硒和屎肠球菌对动物的诸多好处，生产富硒屎肠球菌并将其添加到饲料中可使同一产品具有硒和肠道有益菌的双重益处。生产富硒的屎肠球菌已成为未来添加剂的研究方向之一。目前生产的富硒菌主要有富硒酵母、富硒乳酸菌、富硒粪肠球菌。然而，富硒屎肠球菌的生产尚未见报道。

发明内容