[发明专利]西瓜叶片后绿基因连锁位点及CAPS标记有效
| 申请号： | 202010532717.6 | 申请日： | 2020-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN111549172B | 公开（公告）日： | 2023-02-28 |
| 发明（设计）人： | 朱红菊;刘文革;赵胜杰;何楠;路绪强 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 西安鼎迈知识产权代理事务所(普通合伙) 61263 | 代理人： | 李振瑞 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 西瓜 叶片 基因 连锁 caps 标记 | ||
1.一种西瓜叶片后绿基因CAPS标记，其特征在于，所述CAPS标记采用引物对dg-F和dg-R进行扩增，且扩增片段经BstBI酶切，西瓜叶片后绿纯合子得到755bp的条带，西瓜叶片正常绿纯合子酶切成609p和146bp的两条带，西瓜叶片正常绿杂合子则显示出146bp、609bp和755bp的三条带；
引物dg-F的核苷酸碱基序列为5’-GAAGGATGGCACACTTCGAT-3’；
引物dg-R的核苷酸碱基序列为5’-CAAACTCCACTCCAGGGGTA-3’。
2.根据权利要求1所述的CAPS标记，其特征在于，用于扩增所述CAPS标记的反应程序为：
阶段1：94℃预变性5min；阶段2：94℃20s，60℃20s，72℃30s，共循环34次；阶段3：72℃延伸5min；阶段4：4℃保持。
3.根据权利要求1所述的CAPS标记，其特征在于，用于扩增所述CAPS标记的反应体系以20μL计，包括10μL 2×TaqPCRMasterMix，2μL模板DNA，正、反向引物各1μL和6μL ddH2O。
4.根据权利要求1所述的CAPS标记，其特征在于，所述酶切反应体系以15μL计，包括0.3μL BstBI限制酶、1.5μL buffer、3.2μL ddH2O和10μL PCR产物，37℃酶切过夜。
5.检测权利要求1所述西瓜叶片后绿基因CAPS标记的试剂在西瓜叶片后绿性状分子育种中的应用。
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