[发明专利]一种基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、合成聚合物URPA：

S11、将尿刊酸溶解在二甲基亚砜中，加入二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶，室温避光搅拌1～3h，得尿刊酸溶液；其中，所述尿刊酸、二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶的重量比为5:10:12～5:30:12；所述尿刊酸和二甲基亚砜的重量体积比为1:20～1:50g/mL；

S12、将多糖溶解在二甲基亚砜中，得多糖溶液；将所述多糖溶液转移到步骤S11所述尿刊酸溶液中，室温搅拌24～72h，离心除去沉淀物A，得聚合物溶液；将所述聚合物溶液倒入乙醇A中，过滤收集沉淀物B，将所述沉淀物B依次用乙醇B，丙酮和乙醚洗涤，真空冷冻干燥，得到聚合物URPA；

其中，所述多糖与二甲基亚砜的重量体积比为1:20～1:50g/mL；所述多糖溶液和所述尿刊酸溶液的体积比是1:1～3:1；所述聚合物溶液与乙醇A的体积比为1:4～1:6；所述沉淀物B与乙醇B的重量体积比均为1:50～1:150g/mL，所述沉淀物B与丙酮的重量体积比均为1:50～1:150g/mL，所述沉淀物B和乙醚的重量体积比为1:50～1:150g/mL；所述多糖为普鲁兰多糖，糖原、半乳糖基化壳聚糖中的一种；

S2、合成聚合物LA-URPA：

将α-硫辛酸溶解在二甲基亚砜中，加入二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶，室温搅拌1～3h，得LA溶液；

将步骤S12所述聚合物URPA溶解在二甲基亚砜中，得URPA溶液；

将所述LA溶液加入至所述URPA溶液中，室温搅拌48～96h，离心除去沉淀物C，得溶液LA-URPA；将所述溶液LA-URPA倒入乙醇C中，过滤收集沉淀物D，分别用乙醇D，丙酮和乙醚洗涤所述沉淀物D，真空冷冻干燥，得到聚合物LA-URPA；

其中，所述α-硫辛酸与二甲基亚砜的重量体积比为1:20～1:50g/mL；所述α-硫辛酸、二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶的重量比为5:1:3～5:10:3；所述聚合物URPA与二甲基亚砜的重量体积比为1:20～1:100g/mL；所述LA溶液和所述URPA溶液的体积比为1:1～1:3；所述溶液LA-URPA与乙醇C的体积比为1:4～1:6；所述沉淀物D与乙醇D的重量体积比为1:50～1:150g/mL，所述沉淀物D与丙酮的重量体积比为1:50～1:150g/mL，所述沉淀物D与乙醚的重量体积比为1:50～1:150g/mL；

S3、制备抗癌药物纳米粒子悬浮液：将抗肝癌药物和步骤S2所述聚合物LA-URPA溶解在二甲基亚砜中，室温下边搅拌边滴加蒸馏水，得抗肝癌药物纳米粒子悬浮液；

所述抗肝癌药物和聚合物LA-URPA的重量比为1:5～1:15，所述抗肝癌药物和二甲基亚砜的重量体积比为1:1～3:1mg/mL；所述蒸馏水和二甲基亚砜的体积比是2:1～6:1；

S4、制备抗癌药物纳米粒子：使用超声波细胞破碎仪300～400W，在冰浴中超声处理步骤S3所述抗肝癌药物纳米粒子悬浮液10～30min；然后使用截留分子量为12～14KD的透析袋、用蒸馏水透析12～36h；透析后，取透析袋内的溶液离心去除沉淀，取上清液；将所述上清液通过0.45μm微孔膜过滤，真空冷冻干燥，得到抗肝癌药物纳米粒子。

2.根据权利要求1所述基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤S12所述离心转速为4000rpm、时间10min。

3.根据权利要求1所述基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤S13所述真空冷冻干燥的压强为0～3Pa，冷阱-20～-50℃，干燥2～5天至恒重。

4.根据权利要求1所述基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤S2所述离心转速为4000rpm、时间10min。

5.根据权利要求1所述基于pH和氧化还原双重响应的抗肝癌药物纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤S2所述真空冷冻干燥的压强为0～3Pa，冷阱-20～-50℃，干燥2～5天至恒重。