[发明专利]一种肿瘤标志物8-羟基脱氧鸟苷的检测方法

说明书

本发明公开了一种肿瘤标志物8‑羟基脱氧鸟苷的检测方法，包括以下步骤：准备试剂和设备：所用的主要试剂包括β‑环糊精（β‑CD）、五水硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）、L(+)‑抗环血酸（AA）、尿酸（UA）、羧基化多壁碳纳米管（MWCNTSs）、Nafion®全氟化树脂溶液（Nafion）、8‑羟基脱氧鸟苷（8‑OHdG）、氯化钾（KCl）；本发明通过设置准备试剂和设备、CuNCs材料合成、CuNCs‑MWCNTSs材料的合成、CuNCs‑MWCNTSs‑nafion材料的合成、电极的修饰、8‑OHdG的检测和电化学测试的工艺流程，解决了传统的8‑OHdG测定方法预处理步骤复杂，使用的仪器昂贵，操作程序十分繁琐，这些限制了传统的8‑OHdG测定方适用性的问题，该肿瘤标志物8‑羟基脱氧鸟苷的检测方法，具备预处理步骤十分简单、操作程序比较容易仪器较为普通的优点。

技术领域

本发明涉及医疗检测技术领域，具体为一种肿瘤标志物8-羟基脱氧鸟苷的检测方法。

背景技术

研究表明，8-OHdG是人类DNA分子中鸟嘌呤碱基的第8位C原子在过量的ROS攻击下结合∙OH而生成的一种氧化性加合物。由于8-OHdG的生成及修饰不受饮食等因素的影响，是目前学术界公认的衡量氧化应激及DNA氧化损伤的高效指标。越来越多的研究表明，8-OHdG的含量还与肿瘤的发生，发展密切相关。在肝癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、肺癌和食道癌等患者体液及癌组织内，8-OHdG水平均有较高表达。因此8-OHdG的测量是评估DNA内源性氧化损伤的程度以及作为癌发生的起始和促进因素的关键标志物。

传统的8-OHdG测定方法：如高效液相色谱电化学检测（HPLC-ECD）、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）、酶联免疫吸附法（ELISA）、毛细管电泳-电化学检测法（CE-ECD）和32P标记等。但是传统的8-OHdG测定方法预处理步骤复杂，使用的仪器昂贵，操作程序十分繁琐，这些限制了传统的8-OHdG测定方的适用性，为此提出一种肿瘤标志物8-羟基脱氧鸟苷的检测方法，来解决此问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肿瘤标志物8-羟基脱氧鸟苷的检测方法，解决了传统的8-OHdG测定方法预处理步骤复杂，使用的仪器昂贵，操作程序十分繁琐，这些限制了传统的8-OHdG测定方适用性的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种肿瘤标志物8-羟基脱氧鸟苷的检测方法，包括以下步骤：

步骤1：准备试剂和设备：所用的主要试剂包括β-环糊精（β-CD）、五水硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）、L(+)-抗环血酸（AA）、尿酸（UA）、羧基化多壁碳纳米管（MWCNTSs）、Nafion®全氟化树脂溶液（Nafion）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）、氯化钾（KCl）、铁氰化钾（K₃Fe(CN)₆）、亚铁氰化钾（K₄Fe(CN)₆·3H₂O）、磷酸二氢钠（NaH₂PO₄·2H₂O）、十二水合磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·12H₂O），所用到的主要仪器包括Milli-Q超纯水系统、分析天平、漩涡混匀器、精密移液枪、透射电子显微镜、电化学工作站、数显恒温多头磁力搅拌器、数控超声清洗器、台式酸度计；

步骤2：CuNCs材料合成：首先，称0.011 g β-CD溶于3.0 mL水中；其次，先后加入400.0μL 10.0 mmol/L CuSO₄和100.0μL 1 mol/L AA；在40℃水浴搅拌下反应10h，得到淡黄色CuNCs；