[发明专利]一种不易开伞的黄色金针菇菌种农金49及其分子标记鉴定方法

说明书

本发明提供了一种不易开伞的黄色金针菇菌种‘农金49’及其分子标记鉴定方法，属于金针菇技术领域。本发明以白色金针菇‘农金7号’和黄色金针菇‘G‑20’为亲本进行杂交选育出稳定性好，菌盖浅黄色、不易开伞，单根子实体间不易粘连，菌柄长、整齐度好，产量高，具有很好地开发应用前景的黄色金针菇‘农金49’菌株。该菌株已于2019年12月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M20191019。同时提供了该菌株专一性强、操作简便的分子标记鉴定方法。

技术领域

本发明属于金针菇技术领域，具体涉及一种不易开伞的黄色金针菇菌种‘农金49’及其分子标记鉴定方法。

背景技术

金针菇（Flammulina filiformis）以其营养丰富、味美适口而为人们所熟悉，是我国实现工厂化栽培最早的食用菌，经过几十年的努力，其生产工艺实现了从玻璃瓶栽到聚丙烯袋栽，以及塑料瓶栽的发展。目前金针菇工厂化栽培以白色品种为主，近年来随着白色金针菇市场的饱和，竞争异常激烈，其价格一直处于较低迷状态，金针菇企业面临着巨大的压力。然而此时的黄色金针菇由于栽培量少，相对白色金针菇，则是一种珍贵的品种，黄色金针菇的价格至少比白色金针菇高出一倍，黄色品种显示出较大的商业价值。人们对金针菇商品性状的要求之一是子实体的菌盖要较小，但黄色金针菇的生长发育一般较白色金针菇快，其菌盖较易开伞从而影响其商品性状，因此选育一个不易开伞的黄色金针菇品种则可以弥补这一缺陷。

发明内容

本发明的目的在于，针对现有技术的不足，提供了一种不易开伞的黄色金针菇菌种‘农金49’及其分子标记鉴定方法。

本发明提供的黄色金针菇‘农金49’菌株，其分类命名为：金针菇（Flammulina filiformis）农金49，该菌株已于2019年12月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉 武汉大学；保藏编号CCTCC NO：M 20191019。

本发明提供的黄色金针菇（Flammulina filiformis）‘农金49’，简称‘农金49’是以白色金针菇‘农金7号’和黄色金针菇‘G-20’为亲本进行杂交选育而成，其继承了两个亲本的优良性状。‘农金49’菌种稳定性好，浅黄色，商品外观优美，单根子实体间不易粘连，菌柄偏白、中等粗细，柄较长，菌盖浅黄色、不易开伞，产量高，每袋产量在440～490g，具有很好地开发应用前景。

金针菇‘农金49’的母种培养基为马铃薯葡萄糖培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂条20g，水1000mL；培养条件为常规的金针菇培养，无特殊要求。

本发明还提供了所述金针菇‘农金49’菌株的分子标记鉴定方法，包括菌丝的培养与收集、基因组DNA的提取、特异性片段PCR扩增、PCR产物的电泳检测与DNA测序。

所述特异性片段PCR扩增是由6对引物分别对‘农金49’的DNA进行PCR扩增，经电泳检测分别得到单一的标记片段，6对引物序列和用这6对引物分别扩增‘农金49’的DNA得到的标记片段大小见表1；

表1 特异标记扩增信息

所述PCR产物的电泳检测：经电泳检测，在一个泳道上只有一个片段出现，且片段大小与对应的引物相符（各引物对应的片段大小见表1），是金针菇（Flammulina filiformis）‘农金49’的标记。其中电泳条件为：取PCR产物5～10μL，与1μL上样缓冲液混匀，点样于1.2%的琼脂糖凝胶上，于0.5 X TBE缓冲液中，5V/cm电压下电泳；所述上样缓冲液：0.1％ 溴酚蓝, 40% 蔗糖。