[发明专利]尿液HIV抗体快速检测试剂盒、制备方法及使用方法

说明书

本发明公开了尿液HIV抗体快速检测试剂盒、制备方法及使用方法，尿液HIV抗体快速检测试剂盒包括检测试纸条、含有浓缩介质的样本管、取样杯。检测试纸条由在PVC板上固定的样品垫、金标重组蛋白A结合垫、包HIV重组抗原gp41、gp120和gp36和抗重组蛋白A抗体的硝酸纤维素膜、吸水纸组成。检测时，先用取样杯搜集尿液样本，取尿液样本添加至装有浓缩介质的样本管中，静置3分钟，将试纸条样品垫端插入样本管中，检测尿液样本中是否含有HIV1/2抗体。可广泛应用于包括医院、防疫站、出入境检疫、现场初筛诊断及自测，该发明取样无创、安全、方便、快速，且通过尿液浓缩技术可以显著提高检测灵敏度。

技术领域

本发明涉及HIV检测技术领域，具体为尿液HIV抗体快速检测试剂盒、制备方法及使用方法。

背景技术

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。自1981年被发现以来，HIV病毒在全球经历了复杂的起源和流行过程，据中国疾控中心、联合国艾滋病规划署、世界卫生组织联合评估，截至2018年底，我国存活艾滋病感染者约125万，新发感染者每年8万例左右。虽然我国对HIV感染者的检测和治疗都是免费的，仍有许多人因为“难为情”不愿意在公开场所检测。高危人群进行主动检测的积极性很低，导致约30%的感染者没有被发现，从而造成HIV在高危人群中继续传播。因此，开发无创快速简便的HIV检测方法、技术和产品很重要。本发明基于胶体金免疫层析技术平台，用于体外快速检测尿液中HIV抗体的含量来初步确定是否感染HIV。

尿液中HIV抗体含量约为血液中含量的0.1‰到1‰，相对于血清，其抗体含量微少，因此检测灵敏度低。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供尿液HIV抗体快速检测试剂盒、制备方法及使用方法，采用把尿液浓缩再检测的方式来提高检测灵敏度，明显提高了检测灵敏度，临床符合率高，且无创取样，结果显示清楚，检测效率更高，可以有效解决背景技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：尿液HIV抗体快速检测试剂盒，包括检测试纸条、含有浓缩介质的样本管、取样杯，所述检测试纸条由在PVC板上固定的样品垫、结合垫、包被检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸组成。

进一步的，所述检测试纸条的结合垫上涂有金标重组蛋白A，使用的胶体金颗粒为40nm，使用的胶体金浓度为万分之四，所述重组蛋白A的标记浓度为10-20μg/ml。

进一步的，所述检测试纸条的检测线上包被HIV重组抗原gp41、HIV重组抗原gp120及HIV重组抗原gp36，在质控线上包被有抗重组蛋白A抗体。

进一步的，所述检测线上包被的HIV重组抗原gp41的浓度为0.2-0.4mg/ml，HIV重组抗抗原gp120的浓度为0.2-0.4mg/ml, HIV重组抗原gp36的浓度为0.1-0.2mg/ml。

进一步的，所述质控线上包被的抗重组蛋白A抗体的浓度为0.5-1mg/ml。

进一步的，样本处理时样本管内浓缩介质与尿液样本的比例为1:6-1:8。

尿液HIV抗体快速检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤；

1）将重组蛋白A与胶体金颗粒结合形成的胶体金标记的重组蛋白A溶均匀涂于玻璃纤维上，烘干处理；

2）将检测线包被液划线于硝酸纤维素膜上形成检测线，质控线包被液划线于硝酸纤维素膜上形成质控线，烘干处理；

3）将样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次搭接在底板上，即得。

尿液HIV抗体快速检测试剂盒的使用方法，取0.6-0.8ml的尿液样本于装有浓缩介质的样本管中，反应3min时将检测试纸条的加样端插入尿液样本中，待层析过程完全，5-10min观察结果。