[发明专利]一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法

权利要求书

1.一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基，其特征在于，包括如下种类的培养基：

(1)愈伤组织固体诱导培养基：添加1.0mg/L KT和2.0mg/L 2,4-D的MS培养基，其中蔗糖浓度为50-60g/L，琼脂适量；

(2)愈伤组织固体分化培养基：添加0.05mg/LNAA和1mg/L 6-BA的MS培养基，其中蔗糖20-30g/L，琼脂适量；

(3)不定芽伸长培养基：添加1.5mg/L 6-BA和0.5mg/L IAA的MS培养基；

(4)不定芽生根培养基：添加1mg/LIBA和0.2mg/LNAA的1/2MS培养基。

2.一种使用如权利要求1所述培养基的垂果亚麻花药和/或子房的培养方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)采蕾

采集健壮、未感染病虫害的亚麻植株上蕾长为2-10mm的花蕾；

(2)外植体的选择

选取小孢子处于单核中期至靠边期的垂果亚麻花药所对应花蕾用于后续培养；

(3)外植体的预处理

将采集的材料放置于3-5℃冰箱预处理2-3天，再将花蕾置于30±1℃的培养箱中预处理10-14h，之后进行消毒处理；

(4)外植体的表面消毒

(5)愈伤组织的诱导培养

用无菌滤纸将步骤(4)中花蕾表面的水分吸干，拨开花蕾取下花药和/或子房，接种于愈伤组织固体诱导培养基中，放入黑暗培养箱进行培养，温度为22±2℃，待愈伤长至2-3mm，然后转移至光照强度为1500～2000Lx，8-12h/d光照、12-16h/d黑暗，温度为23～25℃的条件下培养30±3天获取愈伤组织；

(6)愈伤组织的分化培养

将膨大的愈伤组织切成小块，接种于愈伤组织分化培养基中进行分化培养，光照强度为1500-2000Lx，8-12h/d光照、12-16h/d黑暗，温度为22±2℃，经过一短时间的光照培养，分化出不定芽；

(7)不定芽的伸长培养

待不定芽长至0.5-1cm后，接种于不定芽伸长培养基上，进行不定芽的伸长培养，并获得垂果亚麻幼苗，光照强度为1500-2000Lx，8-12h/d光照、12-16h/d黑暗、温度为23±2℃；

(8)不定芽的生根培养

光照培养18-24天，将伸长培养获得的垂果亚麻幼苗接种于生根培养基中进行生根培养，光照强度为1500-2000Lx，8-12h/d光照、12-16h/d黑暗、温度为23±2℃，一段时间后即可获得垂果亚麻再生植株。

3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(3)培养箱中的预处理时间为12h。

4.如权利要求3所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(4)中的消毒方法为：选择花蕾长度为3-5mm，于无菌操作台中，先用75％酒精处理30s～45s，再用20％次氯酸钠处理2-10min，无菌水冲洗4-6次。

5.如权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(4)中花蕾长度为3mm。

6.如权利要求5所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(4)中20％次氯酸钠处理时间为2min。

7.如权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(5)中光照时长为10h/d，黑暗时长为14h/d。

8.如权利要求7所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(6)中光照时长为10h/d，黑暗时长为14h/d。