[发明专利]一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法

说明书

本发明公开了一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法，属于野生亚麻生物技术领域。该培养方法包括基因型选择、外植体低温处理、外植体表面消毒、愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽伸长和生根培养。本发明以垂果亚麻的花药和未受精子房为材料，建立了一套适合垂果亚麻的单倍体再生植株培养体系，直接获得了垂果亚麻的单倍体植株，为亚麻的单倍体育种提供一定的参考价值，同时，对亚麻遗传改良的种质资源保存和新品种选育都具有一定意义，也是保存野生遗传资源的一种手段，为今后的科研工作提供帮助。

技术领域

本发明属于野生亚麻生物技术领域，尤其涉及一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法。

背景技术

垂果亚麻(L.nutans Maxim)属于亚麻科亚麻属，属于野生类型，与目前生产上的亚麻同属不同种。垂果亚麻为多年生草本植物，花期长，蒴果开裂，种子不饱满，发芽率低，多生长于沙质草原和干山坡，具有抗逆性强，丰产性好等优点。由于垂果亚麻具有优良的遗传物质，因此，是亚麻育种重要目标基因的遗传来源，也是种质创新和改造的基础，同时，更是亚麻新品种选育及种质资源创新不可多得的珍贵资源。

单倍体育种可以大大缩短育种年限，加快育种进程，在植物遗传育种理论和实践研究中具有广泛地应用前景。材料的外植体污染问题直接影响愈伤诱导率，从而影响完整再生植株的获得。目前尚未有兼用于垂果亚麻花药和子房培养再生植株的获取方法。整体而言，亚麻单倍体诱导效率较低，难以直接应用于亚麻种质资源创制和亚麻新品种选育。垂果亚麻虽然花期长，但由于蒴果开裂，不易获得种子，且种子常败育，因此常有挖采现象出现。目前，随着人们对野生亚麻生长环境的破坏以及自由挖采，野生亚麻资源受到了不同程度地破坏。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法。本发明以垂果亚麻的花药和未受精子房为材料，建立了一套适合垂果亚麻的单倍体再生植株培养体系，直接获得了垂果亚麻的单倍体植株，为亚麻的单倍体育种提供一定的参考价值，同时，对亚麻遗传改良的种质资源保存和新品种选育都具有一定意义，也是保存野生遗传资源的一种手段，为今后的科研工作提供帮助。

为达上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基，包括愈伤组织固体诱导培养基、愈伤组织固体分化培养基、不定芽伸长培养基、不定芽生根培养基，上述培养基的组分如下：

(1)愈伤组织固体诱导培养基：添加1.0mg/L KT和2.0mg/L 2,4-D的MS培养基，其中蔗糖浓度为50-60g/L，琼脂5.5g/L。

(2)愈伤组织固体分化培养基：添加0.05mg/L NAA和1mg/L 6-BA的MS培养基，其中蔗糖20-30g/L，琼脂7g/L。

(3)不定芽伸长培养基：添加1.5mg/L 6-BA和0.5mg/L IAA的MS培养基。

(4)不定芽生根培养基：添加1mg/L IBA和0.2mg/L NAA的1/2MS培养基。

一种使用上述培养基的垂果亚麻花药和/或子房的培养方法，其步骤如下：

(1)供试基因型的选择

供试材料选择健康、无病害的垂果亚麻植株。

(2)供试材料的选取

供试材料野外生长，无需进行人工干预管理。垂果亚麻的花期长，一般垂果亚麻在5-8月均可见花蕾，可在开花期间采集。

(3)采蕾

采蕾时应选择健壮、未感染病虫害的亚麻植株上的花蕾，在晴天上午9-10点时选择蕾长为2-10mm的花蕾，用小剪刀将花柄剪断后，将同一份材料的花蕾装入自封袋或保鲜袋中，置于冰盒中，带回实验室。在此过程中应注意避免对花蕾造成损伤。