[发明专利]注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备方法

说明书

本发明公开了一种注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备方法与应用。通过碳二亚胺法活化培美曲塞的羰基然后与腐胺‑Boc‑苯丙氨酸二肽反应对培美曲塞进行修饰，利用Boc‑苯丙氨酸二肽的自组装能力将磁性的三氧化铁进行包覆，形成培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒，在磁力的作用下可以使得纳米粒子在肿瘤处富集，从而增加肿瘤处培美曲塞的药物浓度，提高治疗效果。

技术领域

本发明属于纳米药物传递领域，特别涉及一种注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备方法与应用。

背景技术

培美曲塞是一种结构上含有核心为吡咯嘧啶基团的抗叶酸制剂，通过破坏细胞内叶酸依赖性的正常代谢过程，抑制细胞复制，从而抑制肿瘤的生长。其注射剂可以经静脉注射通过血液循环到达病患处从而起到药物化疗作用，但是通过血液循环的药物化疗方式因为药物对人体组织的非选择性而在治疗过程中容易引起的副作用。为了较少副作用，提高药效，因此需要高剂量药物在肿瘤微环境中积累。

纳米颗粒负载药物可以作为一种有效的药物递送方式，但是因为纳米颗粒的稳定性问题，往往需要在使用时合成，再进行药物负载，需要复杂的反应过程，并不适用于临床使用。

发明内容

本发明为了服现有技术缺点和不足，提供一种注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备方法，包括以下步骤：

(1)培美曲塞自组装化合物的制备：

①将DMF，EDAC，NHS，1，4-丁二胺和Boc-苯丙氨酸二肽混合，超声水浴2小时反应得到Boc-苯丙氨酸二肽-腐胺，其中反应物的摩尔比配比为EDAC：NHS：1，4-丁二胺：Boc-苯丙氨酸二肽＝1-1.2：2-2.4：1-1.2：1；

②将DMF，培美曲塞，碳二亚胺类耦合剂，HOAT混合，超声水浴5-20min，然后加入步骤①得到的产物继续超声水浴反应2小时，再加入乙酸乙酯终止反应，离心，弃上清，取沉淀，干燥，得到培美曲塞自组装化合物，其中反应物的摩尔比配比为培美曲塞：碳二亚胺类耦合剂：HOAT：Boc-苯丙氨酸二肽-OD＝1：1.5-5：1.5-5：1.5-5；

(2)注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒制备：

③体积分数为50％的乙醇和四氧化三铁的六氟异丙醇溶液混合均匀制备四氧化三铁磁性颗粒溶液；

④Boc-苯丙氨酸二肽和培美曲塞自组装化合物的六氟异丙醇溶液加入四氧化三铁磁性颗粒溶液中混合均匀，将混合液滴加入去离子水中；

⑤加入PEG200混合均匀，使得PEG200终体积分数为0.5％-2％,乙醇的终体积分数为5％-20％；溶液经磁力分离，离心沉淀，洗涤，干燥得到注射用培美曲塞磁性自组装纳米复合颗粒。

所述参与反应的各原料按如下摩尔比配比：

EDAC：NHS：1，4-丁二胺：Boc-苯丙氨酸二肽＝1.2：2.4：1.2：1；

培美曲塞：碳二亚胺类耦合剂：HOAT：Boc-苯丙氨酸二肽-OD＝1：2.5：2.5：2.5；

体积分数为50％的乙醇与六氟异丙醇体积比为2：1。

最终溶液中PEG200终体积分数为1％，乙醇的终体积分数为10％。

步骤(1)①和②中超声水浴条件为：35℃，80W超声反应；

步骤步骤(1)②中乙酸乙酯的用量为DMF用量的2-6倍；

步骤(1)②和步骤(2)⑤中离心为8000r/min离心5分钟。

步骤(1)中碳二亚胺类耦合剂为DIC，DCC。