[发明专利]一种用于预防和/或治疗冠状病毒感染的药物组合物及其制备方法和其应用

说明书

本发明提供了SARS CoV‑2单表位T细胞抗原肽、由该抗原肽制备得到的多能T细胞表位肽，以及负载所述多能T细胞表位肽的DC细胞，可在体内诱导MHC‑I途径的T细胞免疫，重建机体免疫功能，激发自体CD8+CTL的抗病毒功能，为冠状病毒感染相关疾病的预防和/或治疗提供了更有效、更安全的手段，具有广阔的临床应用和推广前景。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种用于预防和/或治疗冠状病毒感染的药物组合物及其制备方法和其应用。

背景技术

SARS CoV-2感染会导致2019冠状病毒病(COVID-19)，病情严重情况下会导致感染者的死亡。目前尚未开发出针对SARS CoV-2感染有效的治疗药物。若能开发出有效的SARSCoV-2药物，必将对阻断病毒的传播、控制疫情继续爆发挥关键性作用。

截至目前，已有多项SARS CoV-2疫苗项目进入临床试验阶段。美国国家卫生研究院下属的国家过敏症和传染病研究所与莫德纳公司合作研发的mRNA疫苗mRNA-1273于2020年3月5日获FDA批准进入临床试验，3月16日开始了Ⅰ期临床试验。由军事医学研究院生物工程研究所与康希诺生物联合开发的重组新型冠状病毒疫苗(表达SARS CoV-2S抗原的重组腺病毒载体)Ad5-nCoV于2020年3月 18日获得国家药品食品监督管理局(NMPA)的临床批准。由德国 BioNTech生物技术公司与美国辉瑞公司合作开发的mRNA疫苗BNT- 162于2020年4月22日在德国首次获批进行I/II期临床试验。临床进展较快的SARS CoV-2疫苗多为传统的蛋白类疫苗或核酸类疫苗。

靶向树突细胞(Target-Dendritic Cell，简称T-DC)技术可诱导T细胞免疫，重建机体免疫功能并激发自体抗病毒或抗肿瘤功能，达到预防和/或治疗相关疾病的目的，并具有靶向性好、安全性高等特点。该疗法已于2018年10月获得肝癌治疗性疫苗美国FDA孤儿药资质。Luo等(Vaccine，vol28，issue13，pp2497-2504,2010)公开了基于T-DC技术的乙肝疫苗药物，380例慢性肝炎患者经该疫苗药物治疗后,总有效率约为85％，临床治愈率约为40％。

为满足COVID-19临床治疗的迫切需求，本发明创新性地提出了基于T-DC治疗技术开发的抗SARS CoV-2感染的药物组合物及其制备方法和其应用，为COVID-19及其相关疾病的预防和/或治疗提供了新的选择。

发明内容

本发明的目的之一在于提供SARS CoV-2的单表位T细胞抗原肽，所述的单表位T细胞抗原肽选自FLLVTLAIL、FLFLTWICL、SMWSFNPET 的任一种或其组合。

本发明的另一目的在于提供一种多能T细胞表位肽，所述的多能 T细胞表位肽具有式Ⅰ所示结构：

其中，X为碱性氨基酸，Z为单表位T细胞抗原肽。

本发明的优选技术方案中，所述的碱性氨基酸选自精氨酸(R)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)的任一种。

本发明的优选技术方案中，所述的单表位T细胞抗原肽选自 FLLVTLAIL、FLFLTWICL、SMWSFNPET的任一种或其组合。

本发明的另一目的在于提供一种诱导产生负载所述多能T细胞表位肽的DC细胞的方法，包括以下步骤：

1)从外周血或骨髓中分离单核细胞，使用CD14磁珠从所述单核细胞中分选出CD14+细胞；

2)使用GM-CSF和IL-4孵育步骤1)分选的CD14+细胞，将CD14+ 细胞分化为成熟的DC细胞；

3)使用多能T细胞表位肽冲击步骤2)制得的成熟DC细胞，即得负载所述多能T细胞表位肽的DC细胞。