[发明专利]一种人工设计质粒pM5500及其在DNA marker制备中的应用有效
申请号: | 202010547528.6 | 申请日: | 2020-06-16 |
公开(公告)号: | CN111705071B | 公开(公告)日: | 2023-03-10 |
发明(设计)人: | 单丽伟;范三红;胡小平 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N15/11;C12Q1/6806 |
代理公司: | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人: | 李婷;祁凡雨 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人工 设计 质粒 pm5500 及其 dna marker 制备 中的 应用 | ||
1.一种DNA Marker质粒,其特征在于,所述质粒的命名为质粒pM5500,所述质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如权利要求1所述的质粒,其特征在于,所述质粒的核苷酸序列长度为5500bp。
3.如权利要求1所述的质粒,其特征在于,所述质粒中引入了12个同种限制性内切酶BamHI识别位点,通过单酶切可产生6种DNA片段,大小依次为100bp、250bp、500bp、750bp、1000bp和1500bp,相对质量比为1 : 1 : 1 : 3 : 2 : 3。
4.一种DNA Marker质粒的片段化方法,其特征在于,所述方法包括:向权利要求1至3任一项所述的质粒中加入限制性内切酶缓冲液,再加入限制性内切酶BamH I,于37℃或30℃的温度下进行温浴,直到质粒完全酶解,完全酶解后产生6种DNA片段。
5.如权利要求1至3任一项所述的质粒在DNA marker制备中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,首先将所述质粒经BamH I酶切后获得6种DNA片段,然后加入Loading buffer制备DNA marker,或者与其它已知长度DNA片段混合后制备DNA marker。
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