[发明专利]免疫层析检测卡、制备方法及检测方法

权利要求书

1.一种免疫层析检测卡，其特征在于，包括：PVC背衬，以及依次粘附于所述PVC背衬上的样品垫、NC膜和吸水垫，所述NC膜具有测试反应区，所述测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置有质控线及若干检测线，形成反应垫。

2.根据权利要求1所述的免疫层析检测卡，其特征在于，所述检测线为3-8条，按亲和力从大到小的顺序，与吸水垫的距离从近到远排列。

3.根据权利要求1所述的免疫层析检测卡，其特征在于，所述免疫层析检测卡还包括：粘附于所述PVC背衬上且搭接于所述样品垫和NC膜之间的标记垫，所述样品垫与标记垫作用。

4.根据权利要求1所述的免疫层析检测卡，其特征在于，所述样品垫与标记抗体溶液反应，所述标记抗体溶液容置于反应杯中。

5.一种免疫层析检测卡制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

依次将样品垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上；

在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫，所述反应垫与吸水垫相搭接，真空封装，所述样品垫与反应杯中的标记抗体溶液反应。

6.一种免疫层析检测卡制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

依次将样品垫、标记垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上；

在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫；

所述标记垫附于样品垫之上，并与反应垫相搭接，所述反应垫与吸水垫相搭接，真空封装。

7.根据权利要求6所述的免疫层析检测卡制备方法，其特征在于，所述依次将样品垫、标记垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上的步骤之前还包括：

制备标记垫，具体包括：

使用PBS溶液稀释抗体胶体金标记物至工作浓度8μg/mL，均匀浸于玻璃纤维素膜，-20℃冻存，冷冻真空干燥后，得到标记垫，4℃密封保存。

8.根据权利要求6所述的免疫层析检测卡制备方法，其特征在于，所述在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫的步骤包括：

取同源抗原溶解于0.01mol/L的PBS缓冲液(pH 7.2)，形成浓度为100ng/mL，200ng/mL，400ng/mL，800ng/mL，1600ng/mL的溶液，以5mm间隔，经BIO-DOT型XYZ3000点样仪dispenser线形包被于硝酸纤维素膜的观察结果的测试反应区，得到NC膜的测试反应区；

在NC膜的测试反应区上，由距离吸水垫由近到远，分别定义为检测线1，检测线2，检测线3，检测线4和检测线5；

在距离检测线1外5mm处以相同的条件包被羊抗小鼠IgG，定义为质控线，37℃干燥2h，得到反应垫，4℃密封保存。

9.根据权利要求6所述的免疫层析检测卡制备方法，其特征在于，所述在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫的步骤包括：

取5种和免疫原结构不同的异构抗原溶解于0.01mol/L的PBS缓冲液(pH7.2)，形成浓度为400ng/mL的溶液，以5mm间隔，经BIO-DOT型XYZ3000点样仪dispenser线形包被于硝酸纤维素膜的观察结果的测试反应区，得到NC膜的测试反应区；

在NC膜的测试反应区上，由距离吸水纸由近到远，分别定义为检测线1，检测线2，检测线3，检测线4和检测线5；

在距离检测线1外5mm处以相同的条件包被羊抗小鼠IgG，定义为质控线，37℃干燥2h，得到反应垫，4℃密封保存。

10.一种使用权利要求权利要求1-4中的免疫层析检测卡检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将样品待测液滴加于免疫层析检测卡上，等待预设时间观察结果；

通过肉眼观察结果或通过机器基于预先建立的标准曲线定量获得观察结果。