[发明专利]免疫层析检测卡、制备方法及检测方法

说明书

本发明公开了一种免疫层析检测卡、制备方法及检测方法，免疫层析检测卡包括：PVC背衬，以及依次粘附于所述PVC背衬上的样品垫、NC膜和吸水垫，NC膜具有测试反应区，所述测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置有质控线及若干检测线，形成反应垫。本发明检测卡可实现不借助仪器对免疫层析试纸进行定量判读，并且兼具机器读取定量结果的功能，卡片轻便，易于携带。

技术领域

本发明涉及生化检测领域，尤其涉及一种目视机读两用免疫层析检测卡、制备方法及检测方法。

背景技术

近年来随着标记材料的发展，免疫层析法迈入定量检测阶段。然而这些量化数据仍然需要专门的扫描仪进行读取，仪器不便携带且增加了检测成本。不借助仪器对目标物进行量化分析正成为当前一个新的研究热点。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种既可肉眼定量读取也可机器定量读取的目视机读两用免疫层析检测卡、制备方法及检测方法，能实现目标检测物的现场快速鉴定。

为实现上述目的，本发明提出一种免疫层析检测卡，包括：PVC背衬，以及依次粘附于所述PVC背衬上的样品垫、NC膜和吸水垫，所述NC膜具有测试反应区，所述测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置有质控线及若干检测线，形成反应垫。

其中，所述检测线为3-8条，按亲和力从大到小的顺序，与吸水垫的距离从近到远排列。

其中，所述免疫层析检测卡还包括：粘附于所述PVC背衬上且搭接于所述样品垫和NC膜之间的标记垫，所述样品垫与标记垫作用。

其中，所述样品垫与标记抗体溶液反应，所述标记抗体溶液容置于反应杯中。

本发明还提出一种免疫层析检测卡制备方法，包括以下步骤：

依次将样品垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上；

在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫，所述反应垫与吸水垫相搭接，真空封装，所述样品垫与反应杯中的标记抗体溶液反应。

本发明还提出一种免疫层析检测卡制备方法，包括以下步骤：

依次将样品垫、标记垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上；

在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫；

所述标记垫附于样品垫之上，并与反应垫相搭接，所述反应垫与吸水垫相搭接，真空封装。

其中，所述依次将样品垫、标记垫、NC膜和吸水垫粘附于PVC背衬上的步骤之前还包括：

制备标记垫，具体包括：

使用PBS溶液稀释抗体胶体金标记物至工作浓度8μg/mL，均匀浸于玻璃纤维素膜，-20℃冻存，冷冻真空干燥后，得到标记垫，4℃密封保存。

其中，所述在NC膜的测试反应区上沿远离吸水垫的方向间隔设置质控线及若干检测线，形成反应垫的步骤包括：

取同源抗原溶解于0.01mol/L的PBS缓冲液(pH 7.2)，形成浓度为100ng/mL，200ng/mL，400ng/mL，800ng/mL，1600ng/mL的溶液，以5mm间隔，经BIO-DOT型XYZ3000点样仪dispenser线形包被于硝酸纤维素膜的观察结果的测试反应区，得到NC膜的测试反应区；

在NC膜的测试反应区上，由距离吸水垫由近到远，分别定义为检测线1，检测线2，检测线3，检测线4和检测线5；

在距离检测线1外5mm处以相同的条件包被羊抗小鼠IgG，定义为质控线，37℃干燥2h，得到反应垫，4℃密封保存。